应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量pcr,需要将不同样品的DNA稀释成相同的浓度吗？比如说都是20ng/ul
121/2返回列表12下一页
查看: 6183  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

michelly555

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量pcr,需要将不同样品的DNA稀释成相同的浓度吗？比如说都是20ng/ul 已有2人参与

做荧光定量pcr的时候， 需要将不同样品的DNA稀释成相同的浓度吗？比如说都是20ng/ul,如果浓度差别较大的话，会有什么影响呢？急求助帖

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-06-07 08:01:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小-丑鱼

捐助贵宾 (正式写手)

对我而言可爱的她
引用回帖:
8楼: Originally posted by michelly555 at 2015-06-07 12:14:10
我说的不是这个意思，就是说我想要对比这两个样之间菌的数量，但是两个样品提取的DNA的浓度不同，在做qpcr时需要将他们都稀释成相同的浓度吗？比如20ng|ul.都加1ul
...

我不太确定自己有没有明白你的意思，如果只是想要比较两个样之间菌的数量，那提出的DNA浓度不同，已经说明了差距，你是想用qpcr的方法把这种差距具体明确出来？如果是这样的话，实验的体系都一样，模板加入量也一样，例如1ul，但各自浓度不同，辅以标准品做出标准曲线，通过这种方式也能达到目的。
赞一下(1人) 回复此楼
放不下的，除了手中的金箍棒，还有你的手。
9楼2015-06-07 22:24:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

小-丑鱼

捐助贵宾 (正式写手)

对我而言可爱的她

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
michelly555: 金币+7, ★★★很有帮助 2015-06-07 10:04:29
如果浓度不一样，加的量却一样，那么最终得到的结果怎样和对照组比较？
稀释成同一浓度并且加入同样的量的目的，个人认为应该是为了更好的对比。
赞一下 回复此楼
放不下的，除了手中的金箍棒，还有你的手。
2楼2015-06-07 09:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小-丑鱼

捐助贵宾 (正式写手)

对我而言可爱的她

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小-丑鱼 at 2015-06-07 09:58:54
如果浓度不一样，加的量却一样，那么最终得到的结果怎样和对照组比较？
稀释成同一浓度并且加入同样的量的目的，个人认为应该是为了更好的对比。

浓度差别很大的话，导致实际加入的模板量差别很大，扩增得到的结果也会有很大差异，最直接的就体现在CT值上。
赞一下 回复此楼
放不下的，除了手中的金箍棒，还有你的手。
3楼2015-06-07 10:01:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

michelly555

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小-丑鱼 at 2015-06-07 10:01:12
浓度差别很大的话，导致实际加入的模板量差别很大，扩增得到的结果也会有很大差异，最直接的就体现在CT值上。...

我还想问一下，对于不同样品，我们用相同质量的土壤，来提取dna,提取出来的浓度有80还有150ng/ul的，这种差异是样品本身影响的还是试剂盒呢？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-06-07 10:23:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

michelly555

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by michelly555 at 2015-06-07 10:23:48
我还想问一下，对于不同样品，我们用相同质量的土壤，来提取dna,提取出来的浓度有80还有150ng/ul的，这种差异是样品本身影响的还是试剂盒呢？
...

我们做pcr时要把DNA模板都稀释成20ng/ul再做吗？谢谢了,因为自己真是有点混乱了

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2015-06-07 10:26:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小-丑鱼

捐助贵宾 (正式写手)

对我而言可爱的她
引用回帖:
4楼: Originally posted by michelly555 at 2015-06-07 10:23:48
我还想问一下，对于不同样品，我们用相同质量的土壤，来提取dna,提取出来的浓度有80还有150ng/ul的，这种差异是样品本身影响的还是试剂盒呢？
...

都会有因素在其中，但具体是样品本身影响大还是试剂盒影响大，需要做实验才能比对出来。
赞一下 回复此楼
放不下的，除了手中的金箍棒，还有你的手。
6楼2015-06-07 11:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小-丑鱼

捐助贵宾 (正式写手)

对我而言可爱的她
引用回帖:
5楼: Originally posted by michelly555 at 2015-06-07 10:26:15
我们做pcr时要把DNA模板都稀释成20ng/ul再做吗？谢谢了,因为自己真是有点混乱了
...

这个不是确定的，但唯一要确定的是所有样本量一致，例如确定下来要加的模板量为20ng，那就可以稀释成20ng/ul，加1ul，或者稀释成10ng/ul，加2ul，类推。
赞一下 回复此楼
放不下的，除了手中的金箍棒，还有你的手。
7楼2015-06-07 11:27:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

michelly555

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 小-丑鱼 at 2015-06-07 11:27:18
这个不是确定的，但唯一要确定的是所有样本量一致，例如确定下来要加的模板量为20ng，那就可以稀释成20ng/ul，加1ul，或者稀释成10ng/ul，加2ul，类推。...

我说的不是这个意思，就是说我想要对比这两个样之间菌的数量，但是两个样品提取的DNA的浓度不同，在做qpcr时需要将他们都稀释成相同的浓度吗？比如20ng|ul.都加1ul

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
8楼2015-06-07 12:14:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

michelly555

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小-丑鱼 at 2015-06-07 22:24:06
我不太确定自己有没有明白你的意思，如果只是想要比较两个样之间菌的数量，那提出的DNA浓度不同，已经说明了差距，你是想用qpcr的方法把这种差距具体明确出来？如果是这样的话，实验的体系都一样，模板加入量也一样 ...

我也想明白了，之前受了些误导，谢谢你哈

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2015-06-07 23:30:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 michelly555 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:14 by zNcEhTcH7ihq
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:59 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:50 by VMDqgnlKimtZ
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:49 by VMDqgnlKimtZ
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 14:38 by VMDqgnlKimtZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:34 by VMDqgnlKimtZ
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-15 14:14 by VMDqgnlKimtZ
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:13 by VMDqgnlKimtZ
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:34 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 05:22 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭