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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA电泳和PCR产物电泳中加的buffer是一样的吗
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小闲丫丫

新虫 (初入文坛)

[交流] RNA电泳和PCR产物电泳中加的buffer是一样的吗 已有8人参与

RNA或DNA提取后电泳检测时，点样时要加什么试剂？PCR完成后，电泳点样时加的是什么？作用是什么？
我是初学，一点基础都没有，求各位指教，感激
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1楼 2012-11-20 20:54:29
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德国工兵铲

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加入BUFFER，又称上样缓冲液，里面有示踪染料，你能看到样品跑的情况，还有甘油，与产物混合后能够沉入胶空。DNA、RNA，都是一样的。
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2楼2012-11-20 22:24:32
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
RNA loading buffer需要用DEPC水配置
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
3楼2012-11-21 01:55:41
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jl860822

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以用一样的，RNA电泳150v跑15-20min，尽量缩短时间，不会降解的
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4楼2012-11-21 08:49:46
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huangguoqing

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+3, 欢迎分享 2012-11-21 17:26:43
个人建议，仅供参考！
加的是loading buffer，根据加的不同浓度的，最终稀释成1x即可；
作用1：buffer里面含有的甘油、蔗糖与DNA/RNA混合后可以可以增大DNA/RNA密度，使易于上样，样品不易扩散；
作用2：buffer里面含有溴酚蓝，作为前沿指示剂，在不同浓度的胶里面，这条蓝色条带，所代表的DNA/RNA大小不同，我们可以根据他所在的位置确定目的条带的大概位置，并及时终止电泳。
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5楼2012-11-21 09:10:33
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
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补充一下楼上，有些上样buffer里面含有两种指示剂：二甲基苯青FF以及溴酚蓝
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6楼2012-11-21 14:43:55
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
买的酶会附送loading buffer,一般是6×的
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7楼2012-11-22 22:33:27
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zhengli123

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用的缓冲液都是一样的，我们一般用TAE，只不过RNA最好用刚换的缓冲液，或者用DEPC配置的
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8楼2012-11-23 09:33:11
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小闲丫丫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by huangguoqing at 2012-11-21 09:10:33
个人建议，仅供参考！
加的是loading buffer，根据加的不同浓度的，最终稀释成1x即可；
作用1：buffer里面含有的甘油、蔗糖与DNA/RNA混合后可以可以增大DNA/RNA密度，使易于上样，样品不易扩散；
作用2：buffer里 ...

非常感谢
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9楼2012-11-23 10:17:58
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小闲丫丫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 德国工兵铲 at 2012-11-20 22:24:32
加入BUFFER，又称上样缓冲液，里面有示踪染料，你能看到样品跑的情况，还有甘油，与产物混合后能够沉入胶空。DNA、RNA，都是一样的。

10楼2012-11-23 10:18:24
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