应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物检测，点不上样。。。
211/1返回列表
查看: 2975  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR产物检测，点不上样。。。

怪事年年有啊！昨天晚上做的PCR，上午跑胶检测，除了一个样品能够点到胶孔里，其他的都点不进去。。。请教各位大侠，有没有遇到相似情况，什么原因。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-08-16 15:14:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yimingwang

金虫 (小有名气)
★
hechuguiqu11(金币+1): 谢谢参与
多家一点loading dye，loading buffer 换一下，就进去了。
赞一下 回复此楼
2楼2013-08-16 15:50:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秋水素心

银虫 (小有名气)
★
hechuguiqu11(金币+1): 谢谢参与
查下配胶用的buffer浓度
赞一下 回复此楼
3楼2013-08-16 16:54:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xingjiuwcc

木虫 (著名写手)
★
hechuguiqu11(金币+1): 谢谢参与
怎么会点不进去，蓝色样液飘出来了还是怎么的
赞一下 回复此楼
4楼2013-08-16 17:59:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

duanepp

木虫 (小有名气)
★
hechuguiqu11(金币+1): 谢谢参与
胶没有做好
回复此楼
6楼2013-08-17 07:34:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujitianqing

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
上样胶孔底部漏了，或点样时出问题，但这可能性几乎为0。自己上过未加loading buffer的核酸，只有3ul左右，没出问题。
赞一下 回复此楼
7楼2013-08-17 08:25:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

N323

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是胶做的时间太长了，胶空皱缩了？
赞一下 回复此楼
8楼2013-08-17 08:28:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amareyue

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到过几次，就是点进去它会自己跑出来是不是？那是我刚开始做实验的时候遇到的，做久了没再遇到过这种情况，可能是胶的问题，再做一块试试

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2013-08-17 09:47:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yujitianqing at 2013-08-17 08:25:16
上样胶孔底部漏了，或点样时出问题，但这可能性几乎为0。自己上过未加loading buffer的核酸，只有3ul左右，没出问题。

亲，上样胶孔没漏，我用以前跑的PCR产物，可以点进去。。。
赞一下 回复此楼
10楼2013-08-17 15:36:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by duanepp at 2013-08-17 07:34:18
胶没有做好

我重新做了一块，还是不行，而且当时点样，有的样品（PCR过程中部分挥发的样品）能点进去，其他的就点不上。
赞一下 回复此楼
11楼2013-08-17 15:37:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by amareyue at 2013-08-17 09:47:07
我也遇到过几次，就是点进去它会自己跑出来是不是？那是我刚开始做实验的时候遇到的，做久了没再遇到过这种情况，可能是胶的问题，再做一块试试

嗯嗯，是啊！刚开始明明进去了，转眼间就飘出来扩散掉了！我做这个两年了，第一次遇到这种情况。。。
赞一下 回复此楼
12楼2013-08-17 15:39:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by N323 at 2013-08-17 08:28:50
是不是胶做的时间太长了，胶空皱缩了？

我做了块新的，还是这种情况。。。
赞一下 回复此楼
13楼2013-08-17 15:39:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-08-16 16:54:18
查下配胶用的buffer浓度

配胶一直用的1*TAE。。。
赞一下 回复此楼
14楼2013-08-17 15:40:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yimingwang at 2013-08-16 15:50:38
多家一点loading dye，loading buffer 换一下，就进去了。

虫友的意思是换一下PCRmix吗？我们一直用的那家的，没出过问题的。。。且别人也用相同的试剂，也没出现过这种情况。
赞一下 回复此楼
15楼2013-08-17 15:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxliu

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果不是蓝酶就要加Loading Buffer吧。如果是Master mix，你换个酶试试呢。
赞一下 回复此楼
16楼2013-08-17 16:14:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lmcyjxs

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的PCR产物浓度是不是很高，如果是加多点Loading Buffer，这个Loading Buffer本来就是使DNA或RNA沉淀下来方便上样及标记用的！一般样品上样量：上样缓冲液为5:1，但加大上样缓冲液的量不会有很大的影响的。上样的时候，样品和上样缓冲液混匀，配好胶，应该会没问题的。祝好。
赞一下 回复此楼
17楼2013-08-18 11:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by lmcyjxs at 2013-08-18 11:25:03
你的PCR产物浓度是不是很高，如果是加多点Loading Buffer，这个Loading Buffer本来就是使DNA或RNA沉淀下来方便上样及标记用的！一般样品上样量：上样缓冲液为5:1，但加大上样缓冲液的量不会有很大的影响的。上样的时 ...

谢谢！
回复此楼
18楼2013-08-18 20:28:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暗星

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是在点样是将石蜡油吸取到枪头里了，这样看着可以点进去，但是一会又会漂上来！
赞一下 回复此楼
19楼2013-08-19 16:47:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 暗星 at 2013-08-19 16:47:45
是不是在点样是将石蜡油吸取到枪头里了，这样看着可以点进去，但是一会又会漂上来！

谢谢！但是我做PCR时并没有加石蜡油。。。
赞一下 回复此楼
20楼2013-08-28 10:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

RUI1990

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这种情况貌似还是loading buffer的原因吧！仅路过~~~
赞一下 回复此楼
21楼2013-08-28 14:10:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
yingying15885楼
2013-08-16 21:16   回复  
hechuguiqu11(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 hechuguiqu11 的主题更新
211/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +4 Ldrop2023 2026-08-13 4/200 2026-08-14 14:50 by Tide man
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭