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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 不同极性成分的抗氧化活性测定：不同极性部位用萃取试剂来稀释还是无水乙醇？
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bianyu

铜虫 (正式写手)

[求助] 不同极性成分的抗氧化活性测定：不同极性部位用萃取试剂来稀释还是无水乙醇？已有1人参与

请教各位
利用DPPH测定不同极性萃取物的抗氧化活性，查了些资料发现对样品的稀释很少有详细表述的。再有的资料样品用无水乙醇稀释样品，有的用各个萃取试剂来稀释不同部位的样品，也就是说乙酸乙酯部位的样品用乙酸乙酯来稀释，而正丁醇部位的样品用正丁醇来稀释。
我前期用无水乙醇溶解过各部位样品有的样品是不溶的，所以我偏向于用各个萃取试剂来稀释不同部位的样品。但是有个疑问就是DPPH是用无水乙醇来配制的，如果将样品稀释液与DPPH溶液进行反应的话，不同溶剂会不会对结果造成影响？还请各位多多指教！
另一个问题是再用其他抗氧化测定方法，如 FRAP 法等，样品是不是也与DPPH方法采用相同的稀释方法？
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1楼2014-07-01 17:17:40
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颜茉心

金虫 (小有名气)
样品如果做浓度梯度的话，DPPH和样品，使用同样的溶剂比较好吧。
理由：1）制得的不同浓度的样品溶剂相同；
         2）空白对照组使用“纯溶剂+DPPH溶液"测定即可。

PS：倾向于溶剂的乙醇比例高一点，因为不确定其他溶剂对DPPH的影响是否很大。
目的在于交流，欢迎批评指正。
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9楼2014-07-08 10:52:29
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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bianyu: 金币+5, ★有帮助 2014-07-02 11:13:13
楼主先看看无水乙醇和你的各个样品的萃取溶剂是否能达到共溶    一般情况下测定抗氧化性都是用无水乙醇稀释  保证本底吸光度一致   如果你要测  还得测定本底两种溶剂共溶的吸光度
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2楼2014-07-02 08:07:58
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bianyu

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hehua8653 at 2014-07-02 08:07:58
楼主先看看无水乙醇和你的各个样品的萃取溶剂是否能达到共溶    一般情况下测定抗氧化性都是用无水乙醇稀释  保证本底吸光度一致   如果你要测  还得测定本底两种溶剂共溶的吸光度

多谢答复！还有几个比较模糊的问题
1）用无水乙醇的话，正丁醇萃取部位的比较难溶。水萃取部位基本不溶啊~，所以我觉得用无水乙醇是不是不合适呢
2）无水乙醇与萃取溶剂的互溶在一定比例的条件下倒是可以，这让我想起来另外一个问题，不同的文献中DPPH的浓度好像略有不同，而且样品溶液与DPPH试剂所加的比例也不尽相同，不知有没有比较权威的参考资料呢？
3） 如果你要测  还得测定本底两种溶剂共溶的吸光度，是作为对照吗？还是有别的用处？我不是很明白啊能不能仔细讲讲呀

非常感谢
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3楼2014-07-02 11:12:48
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)
1.溶剂具有一定的吸光度   因此测定吸光度必须先扣除溶剂的吸光度
2.你的萃取部位应该稀释成一定浓度  
3.水相用水稀释成一定比例  应该可以溶解一部分
4.文献中的维生素c就是用水溶解
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4楼2014-07-02 12:15:37
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bianyu

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hehua8653 at 2014-07-02 12:15:37
1.溶剂具有一定的吸光度   因此测定吸光度必须先扣除溶剂的吸光度
2.你的萃取部位应该稀释成一定浓度  
3.水相用水稀释成一定比例  应该可以溶解一部分
4.文献中的维生素c就是用水溶解

1.溶剂具有一定的吸光度   因此测定吸光度必须先扣除溶剂的吸光度
如果用溶剂做参比，是不是就能扣除？
2.你的萃取部位应该稀释成一定浓度  
这个肯定是要稀释的，可能我表述的不好，我问的问题中主要是关注用什么来稀释，比较倾向用石油醚稀释石油醚萃取部位，乙酸乙酯稀释乙酸乙酯萃取部位，正丁醇稀释正丁醇萃取部位，水稀释水萃取部位。
3.水相用水稀释成一定比例  应该可以溶解一部分
水相在水里是全部溶解的，应该没有问题。
4.文献中的维生素c就是用水溶解
维生素C是水溶性的，应该是用水溶解吧
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5楼2014-07-02 12:35:38
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)
你的不同极性部位   怎么萃取得到的   用70%乙醇提取，之后再萃取吗  按理说  萃取物可以用70%乙醇再稀释  不知你试过没有
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6楼2014-07-03 08:19:31
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bianyu

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hehua8653 at 2014-07-03 08:19:31
你的不同极性部位   怎么萃取得到的   用70%乙醇提取，之后再萃取吗  按理说  萃取物可以用70%乙醇再稀释  不知你试过没有

对，我是70%乙醇萃取的，还没试过。那就是说不需要其他的试剂来稀释？
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7楼2014-07-03 10:40:36
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by bianyu at 2014-07-03 10:40:36
对，我是70%乙醇萃取的，还没试过。那就是说不需要其他的试剂来稀释？...

可以试着用70%乙醇溶解
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8楼2014-07-03 13:32:15
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bianyu

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 颜茉心 at 2014-07-08 10:52:29
样品如果做浓度梯度的话，DPPH和样品，使用同样的溶剂比较好吧。
理由：1）制得的不同浓度的样品溶剂相同；
         2）空白对照组使用“纯溶剂+DPPH溶液"测定即可。

PS：倾向于溶剂的乙醇比例高一点，因 ...

请问你以前做过这方面的吗？我还没有做，怕浪费DPPH
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10楼2014-07-14 10:21:39
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