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bianyu

铜虫 (正式写手)

[求助] 不同极性成分的抗氧化活性测定:不同极性部位用萃取试剂来稀释还是无水乙醇? 已有1人参与

请教各位
利用DPPH测定不同极性萃取物的抗氧化活性,查了些资料发现对样品的稀释很少有详细表述的。再有的资料样品用无水乙醇稀释样品,有的用各个萃取试剂来稀释不同部位的样品,也就是说乙酸乙酯部位的样品用乙酸乙酯来稀释,而正丁醇部位的样品用正丁醇来稀释。
我前期用无水乙醇溶解过各部位样品有的样品是不溶的,所以我偏向于用各个萃取试剂来稀释不同部位的样品。但是有个疑问就是DPPH是用无水乙醇来配制的,如果将样品稀释液与DPPH溶液进行反应的话,不同溶剂会不会对结果造成影响?还请各位多多指教!
另一个问题是再用其他抗氧化测定方法,如 FRAP 法等,样品是不是也与DPPH方法采用相同的稀释方法?
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颜茉心

金虫 (小有名气)

样品如果做浓度梯度的话,DPPH和样品,使用同样的溶剂比较好吧。
理由:1)制得的不同浓度的样品溶剂相同;
         2)空白对照组使用“纯溶剂+DPPH溶液"测定即可。

PS:倾向于溶剂的乙醇比例高一点,因为不确定其他溶剂对DPPH的影响是否很大。
目的在于交流,欢迎批评指正。
9楼2014-07-08 10:52:29
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
bianyu: 金币+5, 有帮助 2014-07-02 11:13:13
楼主先看看无水乙醇和你的各个样品的萃取溶剂是否能达到共溶    一般情况下测定抗氧化性都是用无水乙醇稀释  保证本底吸光度一致   如果你要测  还得测定本底两种溶剂共溶的吸光度
2楼2014-07-02 08:07:58
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bianyu

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hehua8653 at 2014-07-02 08:07:58
楼主先看看无水乙醇和你的各个样品的萃取溶剂是否能达到共溶    一般情况下测定抗氧化性都是用无水乙醇稀释  保证本底吸光度一致   如果你要测  还得测定本底两种溶剂共溶的吸光度

多谢答复!还有几个比较模糊的问题
1)用无水乙醇的话,正丁醇萃取部位的比较难溶。水萃取部位基本不溶啊~,所以我觉得用无水乙醇是不是不合适呢
2)无水乙醇与萃取溶剂的互溶在一定比例的条件下倒是可以,这让我想起来另外一个问题,不同的文献中DPPH的浓度好像略有不同,而且样品溶液与DPPH试剂所加的比例也不尽相同,不知有没有比较权威的参考资料呢?
3) 如果你要测  还得测定本底两种溶剂共溶的吸光度,是作为对照吗?还是有别的用处?我不是很明白啊能不能仔细讲讲呀

非常感谢
3楼2014-07-02 11:12:48
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)

1.溶剂具有一定的吸光度   因此测定吸光度必须先扣除溶剂的吸光度
2.你的萃取部位应该稀释成一定浓度  
3.水相用水稀释成一定比例  应该可以溶解一部分
4.文献中的维生素c就是用水溶解
4楼2014-07-02 12:15:37
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bianyu

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hehua8653 at 2014-07-02 12:15:37
1.溶剂具有一定的吸光度   因此测定吸光度必须先扣除溶剂的吸光度
2.你的萃取部位应该稀释成一定浓度  
3.水相用水稀释成一定比例  应该可以溶解一部分
4.文献中的维生素c就是用水溶解

1.溶剂具有一定的吸光度   因此测定吸光度必须先扣除溶剂的吸光度
如果用溶剂做参比,是不是就能扣除?
2.你的萃取部位应该稀释成一定浓度  
这个肯定是要稀释的,可能我表述的不好,我问的问题中主要是关注用什么来稀释,比较倾向用石油醚稀释石油醚萃取部位,乙酸乙酯稀释乙酸乙酯萃取部位,正丁醇稀释正丁醇萃取部位,水稀释水萃取部位。
3.水相用水稀释成一定比例  应该可以溶解一部分
水相在水里是全部溶解的,应该没有问题。
4.文献中的维生素c就是用水溶解
维生素C是水溶性的,应该是用水溶解吧
5楼2014-07-02 12:35:38
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)

你的不同极性部位   怎么萃取得到的   用70%乙醇提取,之后再萃取吗  按理说  萃取物可以用70%乙醇再稀释  不知你试过没有
6楼2014-07-03 08:19:31
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bianyu

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by hehua8653 at 2014-07-03 08:19:31
你的不同极性部位   怎么萃取得到的   用70%乙醇提取,之后再萃取吗  按理说  萃取物可以用70%乙醇再稀释  不知你试过没有

对,我是70%乙醇萃取的,还没试过。那就是说不需要其他的试剂来稀释?
7楼2014-07-03 10:40:36
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by bianyu at 2014-07-03 10:40:36
对,我是70%乙醇萃取的,还没试过。那就是说不需要其他的试剂来稀释?...

可以试着用70%乙醇溶解
8楼2014-07-03 13:32:15
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bianyu

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 颜茉心 at 2014-07-08 10:52:29
样品如果做浓度梯度的话,DPPH和样品,使用同样的溶剂比较好吧。
理由:1)制得的不同浓度的样品溶剂相同;
         2)空白对照组使用“纯溶剂+DPPH溶液"测定即可。

PS:倾向于溶剂的乙醇比例高一点,因 ...

请问你以前做过这方面的吗?我还没有做,怕浪费DPPH
10楼2014-07-14 10:21:39
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