| 查看: 1874 | 回复: 5 | ||
axiye新虫 (小有名气)
|
[求助]
real time PCR NTC 阳性扩增
|
| 最近在做real time PCR实验，突然有一次发现用模板10倍稀释所做的标准曲线完全不标准，后来发现无模板对照也有阳性扩增，拿回来跑胶发现是目的片段，切胶回收测序也没有问题，有没有兄弟姐妹遇到过这种问题啊，都是怎么解决的呢？做了快一个月了，仍找不到具体原因，希望高手能够解答！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有258人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR空白对照组阳性
已经有12人回复
- PCR结果的阴性与阳性对照
已经有5人回复
- PCR阳性检测结果，空载体和水都能扩的出来，怎么回事呢？
已经有4人回复
- 菌液PCR是阳性，却提不出来阳性质粒！求助
已经有31人回复
- PCR阴性对照假阳性问题
已经有25人回复
- PCR, southern 转基因植物阳性检测
已经有4人回复
- PCR是阳性但酶切是阴性，怎么回事？
已经有10人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌转化PCR鉴定，没有阳性菌落
已经有5人回复
- 【求助/交流】革兰氏阳性菌PCR问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】菌液PCR鉴定阳性克隆时，总出现非特异性条带
已经有8人回复
- 【求助/交流】Real time PCR 熔点曲线求助，谢谢
已经有12人回复
zhwenxing
木虫 (著名写手)
尛森蟲
- 应助: 11 (小学生)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 2189.8
- 散金: 50
- 红花: 2
- 帖子: 1324
- 在线: 93.3小时
- 虫号: 596551
- 注册: 2008-09-09
- 专业: 疫苗学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 热心的虫虫，欢迎常来 2012-10-30 16:04:48
axiye: 金币+10, ★有帮助 2013-02-25 13:42:19
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 热心的虫虫，欢迎常来 2012-10-30 16:04:48
axiye: 金币+10, ★有帮助 2013-02-25 13:42:19
|
1、楼主的问题其实挺笼统的，N有条带，还是目的片段，说明模板混入了哈，气溶胶？用的枪吸入污染？都有可能 2、稀释10倍跑的不准，注意稀释液和稀释倍数的准确性 3、跑一下内参，看看是技术操作问题，还是PCR体系问题。 4、除了问题，重复两次后仍然有同样的问题，就先停止试验，好好去查查文献。注意，Qpcr的移液器我们都是单独使用的！包括加内参的、N的都是单独用！一般是先配出N来！ |
2楼2012-10-30 15:29:49
3楼2012-10-30 20:13:08
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 16
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10639.6
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3703
- 在线: 790.4小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
4楼2012-10-30 20:16:55
axiye
新虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 211.6
- 散金: 60
- 帖子: 101
- 在线: 37.7小时
- 虫号: 361568
- 注册: 2007-05-04
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2012-10-30 21:24:49
axiye
新虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 211.6
- 散金: 60
- 帖子: 101
- 在线: 37.7小时
- 虫号: 361568
- 注册: 2007-05-04
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2012-10-31 20:01:53
