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lilirong2009

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[交流] 【求助/交流】革兰氏阳性菌PCR问题已有7人参与

我想用革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌的菌液直接作为模板进行pcr反应。我先把金黄色葡萄球菌的菌液离心后，加无菌水混匀，然后沸水浴，迅速放-20度冰箱，离心后的上清液作为模板进行pcr，但是电泳没有条带。请问是什么原因，对于革兰氏阳性菌还有什么其他的好方法做pcr吗？
另外，如果先抽提出金黄色葡萄球菌的DNA，以其DNA作为模板，再进行PCR，在抽提DNA的过程中会不会因有杂菌DNA的污染而干扰PCR反应啊？
多谢指教！

[ Last edited by lilirong2009 on 2011-3-3 at 19:43 ]

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1楼2011-03-03 19:31:56

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brightfuture01

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引用回帖:

Originally posted by lilirong2009 at 2011-03-03 19:31:56:
我想用革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌的菌液直接作为模板进行pcr反应。我先把金黄色葡萄球菌的菌液离心后，加无菌水混匀，然后沸水浴，迅速放-20度冰箱，离心后的上清液作为模板进行pcr，但是电泳没有条带。请问是什 ...

阳性菌比较难破壁，再说冻时也最好用液氮，最低也-80吧。

不会有很大影响的，毕竟你的菌占优势嘛，那么多的菌，掉进去几个杂菌也不会影响的。