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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » qPCR质粒稀释问题
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在屋顶唱歌

铁虫 (初入文坛)
有没有可能是污染了？
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11楼2015-06-13 12:45:33
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 在屋顶唱歌 at 2015-06-13 12:45:33
有没有可能是污染了？

污染的话为什么刚稀释的时候是正常的？
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努力打败一切
12楼2015-06-15 09:42:41
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yzc937168

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
yangjingjing: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-06-16 14:35:40
放在-20或-40吧，不行用EB试一下。
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吼吼吼～
13楼2015-06-15 11:13:56
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易水秋寒

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yangjingjing: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-06-16 14:35:52
qPCR模板最好使用easy dilution稀释，稳定性较好，但不宜长期保存，现用现稀释。
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14楼2015-06-15 16:03:34
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by yzc937168 at 2015-06-15 11:13:56
放在-20或-40吧，不行用EB试一下。

菜鸟，不知道EB是？
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努力打败一切
15楼2015-06-16 14:35:27
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 易水秋寒 at 2015-06-15 16:03:34
qPCR模板最好使用easy dilution稀释，稳定性较好，但不宜长期保存，现用现稀释。

拿怎样可以长期保存呢？
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努力打败一切
16楼2015-06-16 14:36:05
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yzc937168

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by yangjingjing at 2015-06-16 14:35:27
菜鸟，不知道EB是？...

一般是生工或者一些公司试剂盒里的elution buffer

[ 发自小木虫客户端 ]
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吼吼吼～
17楼2015-06-16 15:18:05
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wushenchao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小佳佳佳佳 at 2015-06-12 18:30:48
请问你是做标准曲线吗？你们用什么机器？我们交流下

你好，我最近也在做稀释质粒后，通过跑5个浓度梯度（8e5，8e4，8e3，8e2，8e1）来制备标准曲线用以定量检测目的突变的实验。遇到浓度低于3次方后，就出现2次方结果和1次方结果出峰时间异常的结果。使用的是罗氏480，mix用的是life的master mix，探针为life的MGB。
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18楼2015-06-16 19:33:25
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易水秋寒

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
16楼: Originally posted by yangjingjing at 2015-06-16 14:36:05
拿怎样可以长期保存呢？...

长期保存的话使用TE buffer（10/1）稀释
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19楼2015-06-17 08:03:58
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by yzc937168 at 2015-06-16 15:18:05
一般是生工或者一些公司试剂盒里的elution buffer
...

那个不是纯粹的TE吗？
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努力打败一切
20楼2015-06-17 11:02:23
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