24小时热门版块排行榜    

查看: 1845  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

慢慢的路过

铜虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCR的条带比目标基因要大 已有3人参与

最近做了菌落PCR,出现了很莫名的结果,想向大家咨询一下

图里泳道1,2都是用自己设计的引物P出来的目标基因 ,3-8是菌落PCR的结果。泳道4的是正确的目标基因,已经测过序了。

泳道5.7.8都比目标基因要大一截,我想咨询一下大家这是为什么。

菌落PCR的条带比目标基因要大
H菌落PCR 1,2参照,3-8菌落.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a13515517892

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
请问你pcr扩增的引物都是一样的吗,
4楼2015-06-01 15:46:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1. 污染,连接了非目的片段。
2. 目的基因的可变剪切片段。
3. 目的基因核苷酸序列构象发生变化,这种情况很少。

都需要测序验证。
2楼2015-06-01 14:09:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

calorimetry

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
扩增出比目的基因更大片段的DNA,最可能是模板不纯,或者发生了污染。最简单的处理办法,直接把电泳中纯的目的DNA的电泳带切下来,然后溶解凝胶后回收出其中的DNA,就用后者直接扩增,如果是电泳出来带显示是纯的,就不要去找什么原因了,就用此纯模板扩增就行了。
3楼2015-06-01 14:15:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +3 Tide man 2026-08-14 4/200 2026-08-14 16:33 by Yeuchan
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +4 Ldrop2023 2026-08-13 4/200 2026-08-14 14:50 by Tide man
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +5 cratir 2026-08-14 9/450 2026-08-14 12:25 by 医学老男孩
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见