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woshiap

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于在载体上添加酶切位点 已有2人参与

我有个pm20载体,上面有Sal I的酶切位点,只能单酶切,现在想添加一个xhoI的酶切,实现双酶切。请问该如何操作?感谢各位!
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
切不管你为何这样做,你合生个SalI粘性末端的oligo,退火之后装入SalI位点,中间喜欢什么位点就用什么位点,你要是不喜欢SalI 合生oligo的时候大可以把它灭掉。
3楼2015-05-08 15:01:02
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我有点纳闷你为什么要这么做?这两种酶是同尾酶,双酶切和单酶切没什么区别,不管是单酶切还是双酶切,都不能保证定向连接,那这样双酶切就没有意义了。
2楼2015-05-06 17:27:06
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