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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于在载体上添加酶切位点
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woshiap

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于在载体上添加酶切位点 已有2人参与

我有个pm20载体，上面有Sal I的酶切位点，只能单酶切，现在想添加一个xhoI的酶切，实现双酶切。请问该如何操作？感谢各位！
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1楼 2015-05-06 16:09:42
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我有点纳闷你为什么要这么做？这两种酶是同尾酶，双酶切和单酶切没什么区别，不管是单酶切还是双酶切，都不能保证定向连接，那这样双酶切就没有意义了。
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2楼2015-05-06 17:27:06
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
切不管你为何这样做，你合生个SalI粘性末端的oligo，退火之后装入SalI位点，中间喜欢什么位点就用什么位点，你要是不喜欢SalI 合生oligo的时候大可以把它灭掉。
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3楼2015-05-08 15:01:02
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