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质粒单酶切后,跑胶条带弥散,但是未酶切的跑胶正常,谢各位大侠
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龙猫龙猫龙猫
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质粒单酶切后,跑胶条带弥散,但是未酶切的跑胶正常,谢各位大侠
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如题,用TAKARA的ECORI做质粒单酶切,20微升体系,37℃ 1小时。但是跑胶之后就是弥散的条带。另一个孔的原质粒正常。
为了排除,还做了只加BUFFFER的,但是也弥散了。
MARKER正常。
反复了十几次,都这样,谁能告诉我这是为什么呢。。。。。。。。
谢谢大家!
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1楼
2015-04-28 15:40:26
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酒家何处
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感谢参与,应助指数 +1
把弥散产物酚氯仿抽提或者过一下吸附柱再电泳
[ 发自小木虫客户端 ]
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6楼
2015-04-28 22:40:28
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晞朔
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换个酶试一试,排除你的酶切体系没问题。
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2楼
2015-04-28 16:47:24
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龙猫龙猫龙猫
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专业: 生物大分子结构与功能
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2楼
:
Originally posted by
晞朔
at 2015-04-28 16:47:24
换个酶试一试,排除你的酶切体系没问题。
你好,我分别买了两家公司的酶,NEB和TAKARA的,但是出了一样的问题。我的质粒是用质粒提取试剂盒回收的。在多次失败之后,又进行了一次提取,但是还是一样的问题。
真的不知道怎么回事了。、、、、
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3楼
2015-04-28 16:58:56
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lhl0538
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龙猫龙猫龙猫(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流
2015-04-29 18:51:34
将酶切时间延长或者减少质粒的量减少
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4楼
2015-04-28 18:37:24
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