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龙猫龙猫龙猫

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒单酶切后,跑胶条带弥散,但是未酶切的跑胶正常,谢各位大侠已有4人参与

如题,用TAKARA的ECORI做质粒单酶切,20微升体系,37℃ 1小时。但是跑胶之后就是弥散的条带。另一个孔的原质粒正常。
为了排除,还做了只加BUFFFER的,但是也弥散了。
MARKER正常。
反复了十几次,都这样,谁能告诉我这是为什么呢。。。。。。。。
谢谢大家!
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酒家何处

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把弥散产物酚氯仿抽提或者过一下吸附柱再电泳

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2015-04-28 22:40:28
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查看全部 6 个回答

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换个酶试一试,排除你的酶切体系没问题。
2楼2015-04-28 16:47:24
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龙猫龙猫龙猫

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-04-28 16:47:24
换个酶试一试,排除你的酶切体系没问题。

你好,我分别买了两家公司的酶,NEB和TAKARA的,但是出了一样的问题。我的质粒是用质粒提取试剂盒回收的。在多次失败之后,又进行了一次提取,但是还是一样的问题。
真的不知道怎么回事了。、、、、
3楼2015-04-28 16:58:56
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lhl0538

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
龙猫龙猫龙猫(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-29 18:51:34
将酶切时间延长或者减少质粒的量减少
4楼2015-04-28 18:37:24
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