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将军的石头新虫 (初入文坛)
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[求助]
t载体酶切问题
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| 各位好，我的一个基因连到了t载体上，基因大小为1500左右，想用c l a 1和xho1双切，这个基因上没有两个点，但是过夜酶切后跑胶后只有一条带，大小倒是4200左右，酶都没有问题，怎么回事呢，万分感谢 |
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【答案】应助回帖
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将军的石头(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-04-29 15:35:12
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ClaI的酶切识别序列是AT^CGAT,对dam甲基化敏感，dam甲基化序列是GATC，看看你加的ClaI酶切位点前的碱基是不是G，如果是G的话，这个酶切位点就被甲基化了，从普通大肠杆菌菌株中提取的质粒，用ClaI是切不开的，我觉得你切不开的原因在此，希望反馈的信息 [ Last edited by gyesang on 2013-4-27 at 13:51 ] |
2楼2013-04-27 13:45:23
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10楼2013-04-29 00:05:23
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