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将军的石头

新虫 (初入文坛)

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7楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-29 00:00:12
我给你回了,让你看看ClaI是不是处在甲基化位点内,ClaI是不是被甲基化了,能把那一段序列发上来看看吗?
...

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11楼2013-04-29 00:07:21
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将军的石头

新虫 (初入文坛)

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9楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-29 00:02:10
有,需要用到Dam-的菌株,比如JM110,把质粒转到这个菌里面,再抽质粒,就可以酶切开了
或者你重新设计引物啊,重新扩啊,很简单的事...

jm109行吗,我们实验室没有jm110
12楼2013-04-29 00:10:03
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gyesang

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11楼: Originally posted by 将军的石头 at 2013-04-29 00:07:21
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你这个序列发的不对,我要的是,你设计引物合成的那个引物序列,这个发给我没用

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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
13楼2013-04-29 13:58:46
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12楼: Originally posted by 将军的石头 at 2013-04-29 00:10:03
jm109行吗,我们实验室没有jm110...

jm109是不行的,你可以去查查大肠杆菌的基因型,找dam-的菌株都可以,你可以重新设计引物,重新扩啊
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
14楼2013-04-29 14:00:06
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将军的石头

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
13楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-29 13:58:46
你这个序列发的不对,我要的是,你设计引物合成的那个引物序列,这个发给我没用...

哦,是这样的,引物设计的时候没有加酶切位点,就想直接从t载体上找酶切位点,因为后面还需要跟另外两个不同的载体链接转酵母,所以就没涉及酶切位点,说来话长,反正弄得很郁闷,现在重新克隆连接t载体吧。谢谢你啊,学到很多东西,我是新手,刚做分子生物学,以后又不懂得还要请教了
15楼2013-04-29 23:59:19
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yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

小木虫人才好多呀,连质粒切不开都能找到答案,好厉害,学习了!
特别喜欢家门口开门的瞬间,宝宝那个高兴呀,蹦蹦跳跳,好不热闹!
16楼2013-09-14 21:45:56
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