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skeeterhuang铁虫 (初入文坛)
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[交流]
pcr产物电泳后仅一个样品出现条带，求助 已有4人参与
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提DNA后，测定浓度在20-100ng/ml，配置出PCR体系，跑电泳，只有Maker和一个样品有条带，其他的都无条带，样品是处理不同时间的铜绿微囊藻团聚物，有条带的是处理中间时间的，自己实在找不到原因，第一次做分子实验，请大家多多指教。 20150309_213547_HDR.jpg |
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5楼2015-03-11 20:49:28
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-03-10 22:44:26
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-03-10 22:44:26
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您好，看图大概也能一知半解了，marker跑的也不是很好（这说明胶的质量需要改进）。 除了一个条带，其他尽然连杂带都没有，所以最先考虑的是模板，模板是否已经降解了，模板提取了多长时间，保存条件是什么？引物暂时不考虑，等你出现条带之后在考虑是否为目的条带在考虑引物（个人建议，做实验一步一步来，先找出来为什么没有条带然后再考虑条带大小是否正确）。 然后，试剂问题，你所用的试剂是否已经过期或者因为保存不当失效，当然我不知道你做实验的情况，所以无论概率大小，我们都得说出来嘛，有的时候做不出来，恰恰就是最简单的道理，试剂问题，尤其是酶，分为不同种类，热启动Taq酶，长片段高保真聚合酶，甚至超保真聚合酶等等，选择也是非常重要的。 希望找到问题所在，祝好运 |
4楼2015-03-10 11:20:58
