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绿筱一夏

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶切体系放在室温4个小时,可以放在37°c 继续酶切吗 已有2人参与

酶切体系做完后,忘记放到PCR 仪马上进行酶切,用的酶分别是furmentas 的BamHI和XmaI ,以及EcoRI 和XmaI
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山还在那儿

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉没问题,室温下其实也在酶切的,只是效率不是太高的!

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-08 18:44:55
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绿筱一夏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2014-12-08 18:44:55
感觉没问题,室温下其实也在酶切的,只是效率不是太高的!

主要是怕在室温下会有星号活力,酶会不会乱切
3楼2014-12-08 18:57:30
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山还在那儿

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 绿筱一夏 at 2014-12-08 18:57:30
主要是怕在室温下会有星号活力,酶会不会乱切...

个人觉得室温只会影响切的速率,不会乱切!

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-12-08 20:23:19
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cckk_2000

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
室温放置4小时,那么37度的时候相应的调整一下酶切时间,缩小一下即可。
科研炮灰
5楼2014-12-09 09:03:40
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绿筱一夏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cckk_2000 at 2014-12-09 09:03:40
室温放置4小时,那么37度的时候相应的调整一下酶切时间,缩小一下即可。

37度继续切了5个小时,结果质粒切碎了,重做了
6楼2014-12-09 10:44:40
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