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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 酶切体系放在室温4个小时，可以放在37°c 继续酶切吗
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绿筱一夏

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶切体系放在室温4个小时，可以放在37°c 继续酶切吗 已有2人参与

酶切体系做完后，忘记放到PCR 仪马上进行酶切，用的酶分别是furmentas 的BamHI和XmaI ,以及EcoRI 和XmaI
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1楼 2014-12-08 18:42:20
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山还在那儿

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉没问题，室温下其实也在酶切的，只是效率不是太高的！

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2楼2014-12-08 18:44:55
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绿筱一夏

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2014-12-08 18:44:55
感觉没问题，室温下其实也在酶切的，只是效率不是太高的！

主要是怕在室温下会有星号活力，酶会不会乱切
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3楼2014-12-08 18:57:30
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山还在那儿

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 绿筱一夏 at 2014-12-08 18:57:30
主要是怕在室温下会有星号活力，酶会不会乱切...

个人觉得室温只会影响切的速率，不会乱切！

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4楼2014-12-08 20:23:19
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cckk_2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
室温放置4小时，那么37度的时候相应的调整一下酶切时间，缩小一下即可。
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科研炮灰
5楼2014-12-09 09:03:40
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绿筱一夏

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cckk_2000 at 2014-12-09 09:03:40
室温放置4小时，那么37度的时候相应的调整一下酶切时间，缩小一下即可。

37度继续切了5个小时，结果质粒切碎了，重做了
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6楼2014-12-09 10:44:40
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