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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 电泳为什么会出现这种情况？是不是引物的问题
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去留随意best

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳为什么会出现这种情况？是不是引物的问题 已有10人参与

如图，真的懵了

电泳为什么会出现这种情况？是不是引物的问题
10-16(2,4).jpg
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1楼 2014-10-27 23:07:36
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-28 00:39:40
前面还是后面，后面优化条件就可以跑出很好的条带

[ 发自小木虫客户端 ]
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踏实
2楼2014-10-28 00:28:54
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小村村

新虫 (初入文坛)
★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-10-30 14:33:17
引物特异性不强，引物过多，都有可能吧
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3楼2014-10-28 00:47:40
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非常6+1

银虫 (初入文坛)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 09:01:47
引物特异性不够 建议做个温度梯度 摸索最佳退火温度

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2014-10-28 08:03:09
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流氓一个

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
同意4楼的意见，另外是多大的Marker，感觉是不是没有跑开。。。
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我有我人生
5楼2014-10-28 08:45:21
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jxtp111524

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做个梯度PCR     退火温度没有定好  TM值是多少 多长的片段 引物应该没有问题
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努力加油
6楼2014-10-28 09:41:18
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去留随意best

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hajierlove at 2014-10-28 00:28:54
前面还是后面，后面优化条件就可以跑出很好的条带

为什么阴性对照也会有条带，而且还那么亮？
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7楼2014-10-28 10:55:30
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去留随意best

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 流氓一个 at 2014-10-28 08:45:21
同意4楼的意见，另外是多大的Marker，感觉是不是没有跑开。。。

marker2000。。。用mix做才会出现这种情况，自己加各组分的话就没有条带，崩溃中。。。
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8楼2014-10-28 10:57:55
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lidonghong

金虫 (正式写手)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 09:02:09
引用回帖:
8楼: Originally posted by 去留随意best at 2014-10-28 10:57:55
marker2000。。。用mix做才会出现这种情况，自己加各组分的话就没有条带，崩溃中。。。...

mix扩增效率好点 但是特异性不够  自己加组分的那个酶扩增效率比mix低但特异性好  所以就会出现这种情况  关键来说还是你的引物不够好
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生物化学与分子生物学
9楼2014-10-28 11:52:13
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梨涡浅笑096

木虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-30 14:34:00
觉得MARKER有点没跑开，可能是胶的浓度太浓，或者是电压和时间有点小。引物特异性不太好
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10楼2014-10-28 14:17:29
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