电泳为什么会出现这种情况？是不是引物的问题 - 分子生物 - PCR相关 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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去哪里看海

铁虫 (小有名气)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 09:02:24

引物特异性不够好啊，建议楼主来个梯度PCR，其实温度高了特异性就会好很多，引物设计手册不是说的72℃么？

11楼2014-10-28 17:23:51

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好兵德克

新虫 (初入文坛)

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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-30 14:34:30

我也有过，提高退火温度也不行，建议换个引物试试，我后来设计了一段长引物特异性就强多了。

12楼2014-10-30 14:26:53

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forever909

银虫 (小有名气)

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明显是引物合成的不行吧，你这个即使提高温度也是不行的，引物的纯合度不行，可能得重新设计引物

快乐是最重要的。。。。。。

13楼2014-10-31 09:59:13

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myheat

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gc含量怎么样？看样子gc含量较高，加dmso或用高gcbuffer

[ 发自小木虫客户端 ]

14楼2014-11-01 16:50:30

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