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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 电泳为什么会出现这种情况？是不是引物的问题
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去哪里看海

铁虫 (小有名气)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 09:02:24
引物特异性不够好啊，建议楼主来个梯度PCR，其实温度高了特异性就会好很多，引物设计手册不是说的72℃么？
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11楼2014-10-28 17:23:51
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好兵德克

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-30 14:34:30
我也有过，提高退火温度也不行，建议换个引物试试，我后来设计了一段长引物特异性就强多了。
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12楼2014-10-30 14:26:53
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forever909

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
明显是引物合成的不行吧，你这个即使提高温度也是不行的，引物的纯合度不行，可能得重新设计引物
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快乐是最重要的。。。。。。
13楼2014-10-31 09:59:13
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myheat

铜虫 (小有名气)
gc含量怎么样？看样子gc含量较高，加dmso或用高gcbuffer

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14楼2014-11-01 16:50:30
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