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whatingg

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求帮忙分析一下这周电泳图 已有5人参与

做cDNA扩增的时候跑出来的条带。。新手,求帮忙分析下,谢谢!

求帮忙分析一下这周电泳图
2014-10-26 19 时 46 分race.jpg
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我是瑞瑞

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:03:59
可以更换一下胶和电泳槽的TAE
2楼2014-10-27 10:23:08
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:04:02
whatingg: 金币+5, 这个应该 不是胶的问题 2014-10-28 16:57:53
我的也是这样,marker跑的很好,楼主找到解决的办法了吗
踏实
3楼2014-10-27 20:40:25
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寰宇清

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:04:07
marker跑得很好,说明电泳液和胶没有问题呢。你的样品可能碎了,或是污染了大量RNA。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-10-27 22:27:33
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寰宇清

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:04:10
没注意是cDNA 扩增。应该是引物与模版结合不特异,所以没有明显的目标条带。希望有帮助。

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-10-27 22:30:35
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:04:14
可能是1、产物降解了  2、引物特异性不够  3、模板问题
生物化学与分子生物学
6楼2014-10-28 11:48:45
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ion2013

金虫 (小有名气)

胶没制好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2014-10-28 12:06:32
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灼灼其华cyl

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
亲,如果你是直接拿反转录的cDNA来跑胶,那跑出来的肯定是地毯样的,没有明确的条带。这是cNDA的特点

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-10-28 14:18:15
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whatingg

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 灼灼其华cyl at 2014-10-28 14:18:15
亲,如果你是直接拿反转录的cDNA来跑胶,那跑出来的肯定是地毯样的,没有明确的条带。这是cNDA的特点

是拿反转录后的cdna,两端加了特异的引物,然后跑pcr的。结果就跑出这个样子了
9楼2014-10-28 16:59:41
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梨涡浅笑096

木虫 (初入文坛)

首先,引物二聚体不少,可以适当降低引物浓度。目的条带是多大,拖带很严重,可能是cDNA质量不大好,可能有降解,测个浓度看看。胶的浓度多大?可以适当加大电压看看
10楼2014-10-30 21:48:28
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