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love_st

金虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】帮忙分析下荧光PCR扩增图谱 已有2人参与

今天用细菌的16S的引物探针跑了个PCR,图形比较奇怪,平台之后为什么会是斜上的呢,希望大家帮忙分析下是什么原因!谢谢!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
配合溶解曲线,看看是不是后期的非特异
如果不是非特异,那么最后上升也无所谓,反正分析只会取前面的,后面是不会弄到的,到阈值就好
2楼2010-07-14 16:09:14
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love_st

金虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-07-14 16:09:14:
配合溶解曲线,看看是不是后期的非特异
如果不是非特异,那么最后上升也无所谓,反正分析只会取前面的,后面是不会弄到的,到阈值就好

我的是探针法的,我知道无所谓影响它的阈值,但是整个扩增曲线不是很好看,个人感觉似乎是某种东西过量,但是没法确定
3楼2010-07-14 16:24:39
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

把模板的稀释比例增大一些试试
4楼2010-07-14 16:47:45
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love_st

金虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-07-14 16:47:45:
把模板的稀释比例增大一些试试

稀释到极限浓度后还是一样
5楼2010-07-14 16:58:29
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