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windycui

铁杆木虫 (正式写手)

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[求助] 核酸电泳图求分析

各位虫友，我从昨天开始做PCR及核酸电泳，电泳图出现问题，缓冲液是TAE，新稀释的，marker为4500bp，marker拖尾严重，溶胶时间1min左右，待沸腾后每隔约5秒拿出来摇匀一下，染料用的gelred，电压90v，电泳50min，请各位帮忙分析原因。

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1楼2013-07-04 16:43:23

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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胶是否熔好不能以时间判断，应该通过目测完全没有颗粒物才行。很多时候沸腾后还是有不熔的颗粒，不是趁热摇就可以完全熔掉的。

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3楼2013-07-05 00:51:56

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幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)

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windycui: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢提供意见 2013-07-06 09:02:36

第一可能是胶浓度问题，胶浓度过大不利于大分子DNA的移动，建议配置1%左右的胶，同时在加入TAX后可适当加入3-4ml的水，减少因沸腾蒸发的水。第二可以换个大点的电压试试，我一般是150V跑20min。第三就是你可以把胶从微波炉里拿出来之后确定都熔了就可以加燃料，然后倒在制胶板上冷却就可以，不用冷却一会再加。

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14楼2013-07-06 00:58:13

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