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vickie20

铜虫 (小有名气)

[求助] 核酸染料胶染电泳后一半暗一半亮,求助! 已有2人参与

用的核酸染料是solarbio的goldview I 型核酸染色剂,按照说明书做的胶,电压是100V,大约跑了半小时,我跑的是质粒,条带清楚,但是胶上半截的亮的下半截是暗的,(图片因为电脑出了问题没法取出图片)这个问题怎么样才能解决?
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流! 2011-10-26 18:26:21
GoldView没用过,不过如果是EB的话,会有这种情况。EB电泳时会向负极迁移(跟DNA移动方向相反),所以如果是采用做胶的时候加入EB的方法,最后就会出现胶的背景一半亮一半暗的情况——不过仅是背景会有明暗之分,结合到DNA上的EB不会再跑掉,所以就算是暗的那部分胶,该有条带的话还是会有条带的。
如果你的GoldView也是做胶的时候加入的,那可能就是类似的情况。个人认为这不是什么问题,可以忽略的。非要解决的话,可以改变加入染料的方法,可以上样的时候再把染料加入样品里,或者,跑完胶之后再把胶泡到染料里染色,这两种方法的背景都是一样亮度的。
2楼2011-10-26 12:46:37
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普通回帖

dx123

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2011-10-26 18:26:30
1949stone: 一般和浓度关系不大 浓度大 对人的伤害大 2011-10-28 18:59:52
用goldview I 跑的胶效果不是太好,我觉得你考虑一下是否可以加大染料的使用浓度,我做的时候就加的多点;再有你照相的时候位置是否有移动,可能是没照好;你的染料是直接加到胶里面的吗?加的时候是否按照要求的温度加的?
科研无止境
3楼2011-10-26 13:27:46
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vickie20

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-10-26 12:46:37:
GoldView没用过,不过如果是EB的话,会有这种情况。EB电泳时会向负极迁移(跟DNA移动方向相反),所以如果是采用做胶的时候加入EB的方法,最后就会出现胶的背景一半亮一半暗的情况——不过仅是背景会有明暗之分, ...

如果是用燃料加到样品这样的方法,这个量是怎么加的呢?
4楼2011-10-26 14:50:56
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vickie20

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dx123 at 2011-10-26 13:27:46:
用goldview I 跑的胶效果不是太好,我觉得你考虑一下是否可以加大染料的使用浓度,我做的时候就加的多点;再有你照相的时候位置是否有移动,可能是没照好;你的染料是直接加到胶里面的吗?加的时候是否按照要求的 ...

应该不是因为照相的问题,在跑电泳的时候就可以看到胶上半截是黄色的下半截是白色的;我是将染料直接加到胶里面的,加的时候胶的温度是温温的
5楼2011-10-26 14:54:46
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by vickie20 at 2011-10-26 14:50:56:
如果是用燃料加到样品这样的方法,这个量是怎么加的呢?

……这个不清楚,就知道有这么个用法 --!
6楼2011-10-26 15:52:18
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vickie20

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-10-26 15:52:18:
……这个不清楚,就知道有这么个用法 --!

哦~谢谢你啦~~~
7楼2011-10-26 15:59:14
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thaw

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

改用先电泳后泡胶
8楼2011-10-26 16:13:44
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vickie20

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by thaw at 2011-10-26 16:13:44:
改用先电泳后泡胶

就是为了避免先电泳后跑胶才做的胶染,因为实验室场地和仪器有限,胶染是比较好的选择,但是出了那样的问题很纠结
9楼2011-10-26 16:32:22
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


1949stone(金币+1): 发国外的文章要小心 有处理痕迹检测 2011-10-28 19:00:48
引用回帖:
9楼: Originally posted by vickie20 at 2011-10-26 16:32:22:
就是为了避免先电泳后跑胶才做的胶染,因为实验室场地和仪器有限,胶染是比较好的选择,但是出了那样的问题很纠结

这个其实不算什么问题吧,不会影响结果。真的需要放在文章里的话,再用软件美化下就ok了。
10楼2011-10-26 17:46:04
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