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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 纳米生物材料 » 【交流】求助凝胶电泳疑惑
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lzzsdr123

金虫 (小有名气)

[交流] 【交流】求助凝胶电泳疑惑 已有4人参与

该图是跑胶的结果，中间黑色的是溴酚蓝的条带，但是发现DNA比溴酚蓝跑的距离近好多。第一排共11个样品，第一个是裸DNA的，看不出有跑的迹象，第四、六、九、十一个是DNA应跑出来的，貌似也是像要出来的样子，但是只跑了一点，实验结果不能用，请各位大侠指点一下原因。跑了几次都是这个样子。
我的胶的浓度是1.5%，电压是130v，时间50min，然后EB染色，漂洗掉EB后去看的，结果很失望。
[img][/img]
第二次跑胶结果如下像下图，第四、九条带是复合DNA后被破环应该DNA出来的，加样孔里是看不到DNA了，但是也没有像第一和最后一个裸DNA 跑出来的样子，不知道DNA 跑到哪里去了，麻烦各位大侠帮忙。

[ Last edited by lzzsdr123 on 2010-4-17 at 08:28 ]
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1楼 2010-04-01 10:17:26
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)
★
zhangwj(金币+1):谢谢应助 2010-04-01 11:08
lzzsdr123(金币+2): 2010-04-06 11:24
lzzsdr123(金币+1): 2010-04-17 08:29
质粒多大？胶有些浓吧
我们的质粒5600bp，胶浓度1%，1xTAE，100v，45min
DNA跑的确实是比指示剂慢好多，另外可以在配胶时把EB加到胶中试试，效果应该会好一些，在有你这个成像系统的效果也不好
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2楼2010-04-01 11:05:05
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王庭

木虫 (著名写手)
lzzsdr123(金币+1): 2010-04-06 11:24
lzzsdr123(金币+1): 2010-04-17 08:29
DNA跑不动，琼脂加的量太大了。
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努力做最好的自己！！
3楼2010-04-02 16:37:39
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lzzsdr123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by firebolt at 2010-04-01 11:05:05:
质粒多大？胶有些浓吧
我们的质粒5600bp，胶浓度1%，1xTAE，100v，45min
DNA跑的确实是比指示剂慢好多，另外可以在配胶时把EB加到胶中试试，效果应该会好一些，在有你这个成像系统的效果也不好

对于质粒是多少bp不清楚，质粒是扩他们扩增的，本身是化学专业的，对此也不是很明白。bp的大小对跑胶结果也有什么影响吗？
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4楼2010-04-06 12:45:47
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！ 2010-04-19 20:37
引用回帖:
Originally posted by lzzsdr123 at 2010-04-06 12:45:47:

对于质粒是多少bp不清楚，质粒是扩他们扩增的，本身是化学专业的，对此也不是很明白。bp的大小对跑胶结果也有什么影响吗？

质粒越大跑得越慢啊，把胶配稀一些
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-04-17 14:26:28
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liouwzh

木虫 (正式写手)
★
americanyk(金币+1):tks 2010-07-09 10:54:43
溴酚蓝大概相当于300bp左右。胶的浓度可降低，1-1.2%都可以。同时你的复合DNA有没有可能被降级了，不知道你的处理方法是如何。
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6楼2010-07-09 11:44:25
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Limei！

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为什么要把EB洗去呢，我做琼脂糖凝胶电泳的时候都是直接曝光的，不过我们是在配胶的时候直接加上EB的，效果也挺好的
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7楼2014-02-21 09:48:47
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