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vickie20

铜虫 (小有名气)

[求助] 核酸染料胶染电泳后一半暗一半亮,求助!已有2人参与

用的核酸染料是solarbio的goldview I 型核酸染色剂,按照说明书做的胶,电压是100V,大约跑了半小时,我跑的是质粒,条带清楚,但是胶上半截的亮的下半截是暗的,(图片因为电脑出了问题没法取出图片)这个问题怎么样才能解决?
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vickie20

铜虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-10-26 12:46:37:
GoldView没用过,不过如果是EB的话,会有这种情况。EB电泳时会向负极迁移(跟DNA移动方向相反),所以如果是采用做胶的时候加入EB的方法,最后就会出现胶的背景一半亮一半暗的情况——不过仅是背景会有明暗之分, ...

如果是用燃料加到样品这样的方法,这个量是怎么加的呢?
4楼2011-10-26 14:50:56
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vickie20

铜虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by dx123 at 2011-10-26 13:27:46:
用goldview I 跑的胶效果不是太好,我觉得你考虑一下是否可以加大染料的使用浓度,我做的时候就加的多点;再有你照相的时候位置是否有移动,可能是没照好;你的染料是直接加到胶里面的吗?加的时候是否按照要求的 ...

应该不是因为照相的问题,在跑电泳的时候就可以看到胶上半截是黄色的下半截是白色的;我是将染料直接加到胶里面的,加的时候胶的温度是温温的
5楼2011-10-26 14:54:46
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vickie20

铜虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-10-26 15:52:18:
……这个不清楚,就知道有这么个用法 --!

哦~谢谢你啦~~~
7楼2011-10-26 15:59:14
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vickie20

铜虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by thaw at 2011-10-26 16:13:44:
改用先电泳后泡胶

就是为了避免先电泳后跑胶才做的胶染,因为实验室场地和仪器有限,胶染是比较好的选择,但是出了那样的问题很纠结
9楼2011-10-26 16:32:22
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vickie20

铜虫 (小有名气)

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10楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-10-26 17:46:04:
这个其实不算什么问题吧,不会影响结果。真的需要放在文章里的话,再用软件美化下就ok了。

额……好吧
11楼2011-10-26 20:49:34
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vickie20

铜虫 (小有名气)

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12楼: Originally posted by dx123 at 2011-10-27 09:16:28:
你做的方法和我的差不多,如果不行就换染料试一下。

换了,还是那样,想着是不是琼脂糖的问题,但是我们用的琼脂糖是进口的,这个应该没问题
13楼2011-10-27 09:20:06
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vickie20

铜虫 (小有名气)

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14楼: Originally posted by wanhscn at 2011-10-27 11:16:10:
不知道缓冲液多长时间没有换?

一天没换……………………
15楼2011-10-27 16:09:56
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vickie20

铜虫 (小有名气)

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16楼: Originally posted by xiaoche at 2011-10-27 22:15:51:
这很正常啊,染液和DNA是相向跑的,所以,后面的染液都跑道前部分了,所以后半部分不亮而前部分亮。

但是原来实验室里没出现这样的情况啊,用的是同一种染料同一种琼脂糖。这样的情况怎么解决呢?
18楼2011-10-28 18:49:11
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vickie20

铜虫 (小有名气)

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17楼: Originally posted by xiaoche at 2011-10-27 22:17:07:
建议能做小胶就不要做那种插多排梳子的胶,后面一排梳子的很难看到

做的就是小胶……
19楼2011-10-28 18:49:49
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