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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 核酸染料胶染电泳后一半暗一半亮，求助！
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vickie20

铜虫 (小有名气)

[求助] 核酸染料胶染电泳后一半暗一半亮，求助！ 已有2人参与

用的核酸染料是solarbio的goldview I 型核酸染色剂，按照说明书做的胶，电压是100V，大约跑了半小时，我跑的是质粒，条带清楚，但是胶上半截的亮的下半截是暗的，（图片因为电脑出了问题没法取出图片）这个问题怎么样才能解决？
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1楼 2011-10-26 11:50:19
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
1949stone(金币+1): 发国外的文章要小心 有处理痕迹检测 2011-10-28 19:00:48
引用回帖:
9楼: Originally posted by vickie20 at 2011-10-26 16:32:22:
就是为了避免先电泳后跑胶才做的胶染，因为实验室场地和仪器有限，胶染是比较好的选择，但是出了那样的问题很纠结

这个其实不算什么问题吧，不会影响结果。真的需要放在文章里的话，再用软件美化下就ok了。
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10楼2011-10-26 17:46:04
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流！ 2011-10-26 18:26:21
GoldView没用过，不过如果是EB的话，会有这种情况。EB电泳时会向负极迁移（跟DNA移动方向相反），所以如果是采用做胶的时候加入EB的方法，最后就会出现胶的背景一半亮一半暗的情况——不过仅是背景会有明暗之分，结合到DNA上的EB不会再跑掉，所以就算是暗的那部分胶，该有条带的话还是会有条带的。
如果你的GoldView也是做胶的时候加入的，那可能就是类似的情况。个人认为这不是什么问题，可以忽略的。非要解决的话，可以改变加入染料的方法，可以上样的时候再把染料加入样品里，或者，跑完胶之后再把胶泡到染料里染色，这两种方法的背景都是一样亮度的。
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2楼2011-10-26 12:46:37
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dx123

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-26 18:26:30
1949stone: 一般和浓度关系不大 浓度大 对人的伤害大 2011-10-28 18:59:52
用goldview I 跑的胶效果不是太好，我觉得你考虑一下是否可以加大染料的使用浓度，我做的时候就加的多点；再有你照相的时候位置是否有移动，可能是没照好；你的染料是直接加到胶里面的吗？加的时候是否按照要求的温度加的？
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科研无止境
3楼2011-10-26 13:27:46
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vickie20

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-10-26 12:46:37:
GoldView没用过，不过如果是EB的话，会有这种情况。EB电泳时会向负极迁移（跟DNA移动方向相反），所以如果是采用做胶的时候加入EB的方法，最后就会出现胶的背景一半亮一半暗的情况——不过仅是背景会有明暗之分， ...

如果是用燃料加到样品这样的方法，这个量是怎么加的呢？
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4楼2011-10-26 14:50:56
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