24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 3481  |  回复: 36
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

windycui

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 核酸电泳图求分析

各位虫友,我从昨天开始做PCR及核酸电泳,电泳图出现问题,缓冲液是TAE,新稀释的,marker为4500bp,marker拖尾严重,溶胶时间1min左右,待沸腾后每隔约5秒拿出来摇匀一下,染料用的gelred,电压90v,电泳50min,请各位帮忙分析原因。
核酸电泳图求分析
1.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幽魂银龙

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助! 2013-07-06 02:04:02
windycui: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢提供意见 2013-07-06 09:02:36
第一可能是胶浓度问题,胶浓度过大不利于大分子DNA的移动,建议配置1%左右的胶,同时在加入TAX后可适当加入3-4ml的水,减少因沸腾蒸发的水。第二可以换个大点的电压试试,我一般是150V跑20min。第三就是你可以把胶从微波炉里拿出来之后确定都熔了就可以加燃料,然后倒在制胶板上冷却就可以,不用冷却一会再加。
14楼2013-07-06 00:58:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 37 个回答

武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-04 22:36:15
windycui: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢提供帮助 2013-07-06 09:00:48
1,胶的浓度,,2,marker有无污染,,有些dna酶污染。可以影响条带
2楼2013-07-04 21:47:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验! 2013-07-05 15:03:22
windycui: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢提供意见 2013-07-06 09:01:07
胶是否熔好不能以时间判断,应该通过目测完全没有颗粒物才行。很多时候沸腾后还是有不熔的颗粒,不是趁热摇就可以完全熔掉的。
3楼2013-07-05 00:51:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windycui

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-07-04 21:47:21
1,胶的浓度,,2,marker有无污染,,有些dna酶污染。可以影响条带

marker是新的,应该没有污染吧

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-07-05 07:53:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见