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windycui

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 核酸电泳图求分析

各位虫友,我从昨天开始做PCR及核酸电泳,电泳图出现问题,缓冲液是TAE,新稀释的,marker为4500bp,marker拖尾严重,溶胶时间1min左右,待沸腾后每隔约5秒拿出来摇匀一下,染料用的gelred,电压90v,电泳50min,请各位帮忙分析原因。
核酸电泳图求分析
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windycui

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-07-05 11:31:09
Marker是不是发生了断裂或者降解。凝胶浓度是不是不均匀,可能是凝胶的冷却过程处理的不好。

请问凝胶的冷却过程如何处理呢?胶是从微波炉里拿出来的,微波炉屋没有空调,凝胶屋空调大概25度左右,冷却一段时间,至手可以忍受的温度后加染料,然后倒入电泳槽子,有问题吗?
9楼2013-07-05 11:37:16
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-04 22:36:15
windycui: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢提供帮助 2013-07-06 09:00:48
1,胶的浓度,,2,marker有无污染,,有些dna酶污染。可以影响条带
2楼2013-07-04 21:47:21
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验! 2013-07-05 15:03:22
windycui: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢提供意见 2013-07-06 09:01:07
胶是否熔好不能以时间判断,应该通过目测完全没有颗粒物才行。很多时候沸腾后还是有不熔的颗粒,不是趁热摇就可以完全熔掉的。
3楼2013-07-05 00:51:56
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windycui

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 武穆大成 at 2013-07-04 21:47:21
1,胶的浓度,,2,marker有无污染,,有些dna酶污染。可以影响条带

marker是新的,应该没有污染吧

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-07-05 07:53:27
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