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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求帮忙分析一下这周电泳图
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whatingg

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求帮忙分析一下这周电泳图 已有5人参与

做cDNA扩增的时候跑出来的条带。。新手，求帮忙分析下，谢谢！

求帮忙分析一下这周电泳图
2014-10-26 19 时 46 分race.jpg
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1楼 2014-10-26 22:08:07
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我是瑞瑞

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:03:59
可以更换一下胶和电泳槽的TAE
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2楼2014-10-27 10:23:08
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:04:02
whatingg: 金币+5, 这个应该 不是胶的问题 2014-10-28 16:57:53
我的也是这样，marker跑的很好，楼主找到解决的办法了吗
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踏实
3楼2014-10-27 20:40:25
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寰宇清

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:04:07
marker跑得很好，说明电泳液和胶没有问题呢。你的样品可能碎了，或是污染了大量RNA。

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4楼2014-10-27 22:27:33
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寰宇清

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:04:10
没注意是cDNA 扩增。应该是引物与模版结合不特异，所以没有明显的目标条带。希望有帮助。

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5楼2014-10-27 22:30:35
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-28 12:04:14
可能是1、产物降解了  2、引物特异性不够  3、模板问题
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生物化学与分子生物学
6楼2014-10-28 11:48:45
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ion2013

金虫 (小有名气)
胶没制好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2014-10-28 12:06:32
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灼灼其华cyl

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
亲，如果你是直接拿反转录的cDNA来跑胶，那跑出来的肯定是地毯样的，没有明确的条带。这是cNDA的特点

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8楼2014-10-28 14:18:15
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whatingg

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 灼灼其华cyl at 2014-10-28 14:18:15
亲，如果你是直接拿反转录的cDNA来跑胶，那跑出来的肯定是地毯样的，没有明确的条带。这是cNDA的特点

是拿反转录后的cdna，两端加了特异的引物，然后跑pcr的。结果就跑出这个样子了
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9楼2014-10-28 16:59:41
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梨涡浅笑096

木虫 (初入文坛)
首先，引物二聚体不少，可以适当降低引物浓度。目的条带是多大，拖带很严重，可能是cDNA质量不大好，可能有降解，测个浓度看看。胶的浓度多大？可以适当加大电压看看
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10楼2014-10-30 21:48:28
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