24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2316  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

人于两点

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

[求助] 质粒和片段连接后,酶切验证错误!(求大神指导) 已有2人参与

如图所示,line 1和2 是质粒和片段(图片不清晰,用红线代替)连接后的酶切验证
质粒大小为4570bp 片段大小为750bp
因为把连接好的质粒送过去测序,发现正向引物F(片段的)测序无信号,反向引物R(片段的)测序是正确的。
所以,想酶切验证一下,发现酶切下来的片段大小不对,酶切的片段大小约为1000,而目的片段为750bp。
哪位大神告诉我是什么原因啊?

质粒和片段连接后,酶切验证错误!(求大神指导)
图片1.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

人于两点

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
4楼: Originally posted by s_lich28 at 2014-10-19 14:58:44
楼主测序的正向引物是从质粒上开始还是从目标片段上开始读的?...

正反引物都是质粒的通用引物(都是在质粒酶切位点上)
5楼2014-10-19 16:55:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

s_lich28

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-19 18:18:13
楼主的目标片段大小是750bp,但图中lane 2中楼主用红线标注出来的片段如果是实际接入的片段的话那长度是1kb,所以建议楼主验证目标片段后再做链接。
There is nothing either good or bad, thinking makes it so.
2楼2014-10-18 21:47:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

人于两点

版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

引用回帖:
2楼: Originally posted by s_lich28 at 2014-10-18 21:47:41
楼主的目标片段大小是750bp,但图中lane 2中楼主用红线标注出来的片段如果是实际接入的片段的话那长度是1kb,所以建议楼主验证目标片段后再做链接。

额,那为什么我测序结果是对的?
3楼2014-10-19 13:54:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s_lich28

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 人于两点 at 2014-10-19 14:54:21
额,那为什么我测序结果是对的?...

楼主测序的正向引物是从质粒上开始还是从目标片段上开始读的?
There is nothing either good or bad, thinking makes it so.
4楼2014-10-19 14:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 080200学硕,机械工程专业277分,求带走! +4 瓶子PZ 2026-03-31 4/200 2026-03-31 20:16 by vgtyfty
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-29 10/500 2026-03-31 19:52 by Dyhoer
[考研] 省双一流重点一本大学招收调剂 +3 wwwwffffff 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:49 by 曾曾曾!
[考研] 290分调剂求助 +10 吉祥止止陈 2026-03-25 10/500 2026-03-31 17:54 by 544594351
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +11 萝卜炖青菜 2026-03-28 12/600 2026-03-31 17:54 by xhai2011
[考研] 08开头看过来!!! +3 wwwwffffff 2026-03-31 5/250 2026-03-31 17:45 by 星光/
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-30 11/550 2026-03-31 17:33 by AZMK
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +10 26要上岸 2026-03-28 10/500 2026-03-31 16:04 by 记事本2026
[基金申请] 面上5B能上会吗? +8 redcom 2026-03-29 8/400 2026-03-31 15:53 by niuailing
[考研] 085404 22408 315分 +5 zhuangyan123 2026-03-31 6/300 2026-03-31 13:48 by limeifeng
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-31 4/200 2026-03-31 11:56 by jp9609
[考研] 083000学硕274求调剂 +12 Li李鱼 2026-03-26 12/600 2026-03-31 10:01 by cal0306
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 抱歉 +4 田洪有 2026-03-30 4/200 2026-03-30 21:26 by mumin1990
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 21:07 by peike
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +12 芋泥小铃铛 2026-03-28 12/600 2026-03-30 17:06 by wangjy2002
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 265求调剂 +8 小木虫085600 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:16 by 无际的草原
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
信息提示
请填处理意见