应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 单酶切后载体变小
71/1返回列表
查看: 1309  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小小菲菲427

新虫 (初入文坛)

[求助] 单酶切后载体变小 已有4人参与

新手实验，遇到一点困难，还望各位大神解答啊！用T-easy载体连接PCR产物后，转化，提取，单酶切，电泳后验证发现载体竟然变小了！空载体应该是3015bp，可电泳后只跑出了2800bp，这是肿么回事呢？各位大神帮帮小弟吧！不胜感激！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-09-11 16:01:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huyan0817

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小小菲菲427(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-12 10:46:47
楼主看看T载体上面所含的酶切为点吧！可能是载体上面也有你所切的酶切位点或者是分析下你的目的基因片段，可能你的目的基因也含这个酶切位点！如果都不是的话，楼主可以试一试电压小点比如60V跑电泳！祝实验顺利！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-09-11 16:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kehan777

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-12 10:46:57
单酶切，如果该酶在该载体上有两个酶切位点，切出两条带，其中一条太小看不出来也有可能
另外，电泳的原因：
其实3000和2800距离很近，你再可以跑久一些，（前提是胶够长，电压可降低一点）
也有可能是你的基因问题，切不开的质粒是否会跑得快一些？可以再做个双酶切鉴定
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-09-12 07:51:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuenyunliu

铜虫 (初入文坛)
你知道是单酶切，这么自信？
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-18 21:41:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

如果有2个酶切位点就小了
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2014-09-19 09:38:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
小小菲菲427(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-19 16:33:50
仔细分析一下序列，建议在目的基因找一个位点，在载体上找一个位点双切。
赞一下 回复此楼
6楼2014-09-19 10:38:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)
xxxxxx

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
7楼2014-09-19 10:42:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小小菲菲427 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 308求调剂 +5 墨墨漠 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:19 by 544594351
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +6 NIFFFfff 2026-03-20 6/300 2026-03-24 21:02 by hello七七
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭