| 查看: 2009 | 回复: 16 | ||
永峰1230铜虫 (小有名气)
|
[求助]
重组菌质粒提取失败 已有6人参与
|
|
|
目的基因和pet28α 连接后 涂布 挑单菌落。 单菌落 LB培养--TB培养，提取质粒，但是提取不出来质粒。 培养基中都加有抗生 质粒是用生工试剂盒提取，，已证明试剂盒没有问题。 请问，提取不出来质粒是什么原因呢？？ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有124人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 细菌质粒提取及ＰＣＲ
已经有8人回复
- 重复做了3次，质粒提取正常，测序时总是“没信号”，大家有没遇到过这种情况？
已经有4人回复
- 质粒的提取及测序问题
已经有9人回复
- 重组质粒提取，结果提取片段跑胶 比实际还大，请各位大侠给指点一下
已经有13人回复
- 质粒提取，结果出现四条、五条带，请大神指教！
已经有25人回复
- 重组质粒，摇菌提取质粒后，如何测序？
已经有5人回复
- 细菌质粒提取浓度太低求助
已经有29人回复
- 求助~~~~大肠杆菌内质粒会不会自行发生同源重组？
已经有11人回复
- 转化感受态后提取质粒，测浓度总是很低
已经有17人回复
- 目的片段+pPIC9K载体转化大肠杆菌DH5a后提取质粒失败
已经有13人回复
- 菌液pcr出来后，质粒提不出，测序老失败？
已经有6人回复
- 菌液PCR结果不正确
已经有4人回复
- 原核表达重组质粒提取
已经有7人回复
- 求助：重组质粒酶切问题！请大家帮我解决一下，急！
已经有7人回复
- 十万火急，重组质粒酶切只有一条带，测序有结果，但反复说我质粒浓度很低
已经有16人回复
- 质粒提取，超螺旋前面还有一条带，怎么回事？
已经有18人回复
- 重组的质粒提取出来线性总是比超螺旋的多很多呢？
已经有4人回复
- 有人提取过PET-28a的质粒吗？
已经有18人回复
- 请教重组质粒快检的具体方法以及原理。。。。
已经有15人回复
- 提取大肠杆菌质粒失败的原因
已经有11人回复
- 【求助/交流】提取链霉菌质粒
已经有8人回复
- 【求助/交流】质粒提取线性化的很多
已经有8人回复
- 【求助/交流】大家讨论一下SDS在质粒提取中的作用吧
已经有5人回复
- 【求助/交流】我用菌液摇菌抽提质粒浓度很低，请大家帮忙解决下，为什么
已经有16人回复
- 【求助/交流】质粒提取不出来--郁闷
已经有24人回复
huyan0817
木虫 (正式写手)
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 3604.8
- 红花: 3
- 帖子: 344
- 在线: 119.7小时
- 虫号: 1232425
- 注册: 2011-03-14
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
8楼2014-09-11 10:56:56
luwei13566
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4350.4
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永峰1230: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-11 19:01:02
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-09-12 10:49:59
感谢参与，应助指数 +1
永峰1230: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-11 19:01:02
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-09-12 10:49:59
|
实验室里很多杂菌都是有对卡纳的耐受性的，LZ的问题应该出现在感受态细胞本身或者转化过程中染了杂菌。 1.建议以后做转化的时候各种对照一定要做好。 2.倒平板的时候抗生素最好还是提前加到琼脂里。 3.抗生素的量一定要加足。转化的时候操作也要注意，如果配的CaCl2已经用了很多次，最好重新配置灭菌 对于你现在平板上的那批转化子，尽量多挑转化子做菌落PCR看是否有基因是可行的方案，但是假阳性也是可能的，就算扩出条带也不一定有质粒，还是重新做一次比较可靠。 |
9楼2014-09-11 18:16:27
永峰1230
铜虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 239.8
- 散金: 8
- 帖子: 251
- 在线: 108.7小时
- 虫号: 2638768
- 注册: 2013-09-06
- 性别: GG
- 专业: 食品加工技术
2楼2014-09-11 09:11:20
西门吹雪170
荣誉版主 (职业作家)
- MolEPI: 1
- 应助: 92 (初中生)
- 贵宾: 0.982
- 金币: 27278.4
- 散金: 1072
- 红花: 40
- 沙发: 2
- 帖子: 3092
- 在线: 438.7小时
- 虫号: 1209807
- 注册: 2011-02-22
- 性别: MM
- 专业: 认知科学
- 管辖: 分子生物
3楼2014-09-11 09:19:50
13227213581
木虫 (正式写手)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 1504.2
- 散金: 10
- 红花: 5
- 帖子: 403
- 在线: 67.4小时
- 虫号: 2868417
- 注册: 2013-12-13
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2014-09-11 09:25:11
huyan0817
木虫 (正式写手)
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 3604.8
- 红花: 3
- 帖子: 344
- 在线: 119.7小时
- 虫号: 1232425
- 注册: 2011-03-14
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2014-09-11 09:55:21
永峰1230
铜虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 239.8
- 散金: 8
- 帖子: 251
- 在线: 108.7小时
- 虫号: 2638768
- 注册: 2013-09-06
- 性别: GG
- 专业: 食品加工技术
6楼2014-09-11 10:11:03
永峰1230
铜虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 239.8
- 散金: 8
- 帖子: 251
- 在线: 108.7小时
- 虫号: 2638768
- 注册: 2013-09-06
- 性别: GG
- 专业: 食品加工技术
7楼2014-09-11 10:12:09
永峰1230
铜虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 239.8
- 散金: 8
- 帖子: 251
- 在线: 108.7小时
- 虫号: 2638768
- 注册: 2013-09-06
- 性别: GG
- 专业: 食品加工技术
10楼2014-09-11 19:01:16
10