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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组菌质粒提取失败
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欧阳-90

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
永峰1230(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-14 09:24:08
确认试剂中乙醇加了吗？我的同事最近抽质粒就是因为没有加乙醇，有几次没有抽出来
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11楼2014-09-12 14:47:04
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紫夜微蓝

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你自己之前做用这个试剂盒过提质粒吗？如果成功过的话基本排除操作和试剂盒原因。

转化后平板的生长情况如何，菌落状态是否有异样？你挑取了几个克隆，都提不出质粒吗？
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12楼2014-09-12 15:46:37
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 紫夜微蓝 at 2014-09-12 15:46:37
你自己之前做用这个试剂盒过提质粒吗？如果成功过的话基本排除操作和试剂盒原因。

转化后平板的生长情况如何，菌落状态是否有异样？你挑取了几个克隆，都提不出质粒吗？

试剂盒没问题的，，提取了别的菌，能提取出来。。。------转化后平板长了几个菌落， 其中一个平板长满了单菌落，，  其中有三个用试剂盒提取出了，条带比预期的小很多
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12
13楼2014-09-12 18:17:43
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 欧阳-90 at 2014-09-12 14:47:04
确认试剂中乙醇加了吗？我的同事最近抽质粒就是因为没有加乙醇，有几次没有抽出来

加了的，试剂盒一直都在用
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12
14楼2014-09-12 18:18:07
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紫夜微蓝

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你说的提不出质粒是指浓度测不出来还是电泳出现问题？建议跑一下电泳
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15楼2014-09-13 20:46:53
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xiwangyuer

新虫 (初入文坛)
我也用pET28a 后来都用氯霉素扩了再提 感兴趣可以参考《分子克隆》
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16楼2014-09-16 20:17:57
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by xiwangyuer at 2014-09-16 20:17:57
我也用pET28a 后来都用氯霉素扩了再提 感兴趣可以参考《分子克隆》

氯霉素 啊，，不清楚啊，，《分子克隆》是有的，，要好好看看了
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12
17楼2014-09-17 23:59:40
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