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jjwhl
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重组质粒提取,结果提取片段跑胶 比实际还大,请各位大侠给指点一下
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小虫再做大肠杆菌重组质粒(线性质粒加目的基因共6700左右)提取,结果提取片段跑胶 比10000还大,请各位大侠给指点一下
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1楼
2014-03-05 16:00:54
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jjwhl
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这是载体自连接吗?求指导
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2014-03-05 16:04:38
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鬼羽帝魂
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你这是跑的质粒?建议单酶切后与原先的载体对比一下。
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3楼
2014-03-05 16:10:47
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jjwhl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流!
2014-03-31 00:55:38
可能是基因组,要是大肠杆菌的基因组肯定比10000大,你能否说明具体点,包括提取的方法......。
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4楼
2014-03-05 16:55:41
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jiaoxiayoulu
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专业: 微生物遗传育种学
我也觉得应该是载体自连啊!
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5楼
2014-03-05 18:16:36
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西门吹雪170
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2014-03-31 00:55:45
这是很常见的问题,不影响,你可以拿这个提取出来的质粒用你的特异性引物进行PCR验证是否有目的基因插入
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植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
6楼
2014-03-05 18:39:52
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2014-03-31 00:55:55
你选几个酶切位点酶切再验证一下。差异这么大一定有些问题。
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hehe
7楼
2014-03-05 21:10:23
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4楼
:
Originally posted by
forrestgump
at 2014-03-05 16:55:41
可能是基因组,要是大肠杆菌的基因组肯定比10000大,你能否说明具体点,包括提取的方法......。
提取的话 是用的宝生生物的质粒out试剂盒,我要从大肠杆菌中提一个师姐构建好的重组质粒,pET28a5300左右 ,目的片段大约1700左右,提出来的看着远大于10000啊
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8楼
2014-03-05 22:45:43
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5楼
:
Originally posted by
jiaoxiayoulu
at 2014-03-05 18:16:36
我也觉得应该是载体自连啊!
要是自连接的话 怎么操作呢
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9楼
2014-03-05 22:46:26
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7楼
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Originally posted by
lvbobo823
at 2014-03-05 21:10:23
你选几个酶切位点酶切再验证一下。差异这么大一定有些问题。
前面双酶切了两次 酶切完了 都没条带啊
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10楼
2014-03-05 22:47:03
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