24小时热门版块排行榜    

查看: 3369  |  回复: 13

jjwhl

银虫 (正式写手)

[求助] 重组质粒提取,结果提取片段跑胶 比实际还大,请各位大侠给指点一下 已有6人参与

小虫再做大肠杆菌重组质粒(线性质粒加目的基因共6700左右)提取,结果提取片段跑胶 比10000还大,请各位大侠给指点一下
重组质粒提取,结果提取片段跑胶 比实际还大,请各位大侠给指点一下
1.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)

这是载体自连接吗?求指导
2楼2014-03-05 16:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

你这是跑的质粒?建议单酶切后与原先的载体对比一下。
3楼2014-03-05 16:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jjwhl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 00:55:38
可能是基因组,要是大肠杆菌的基因组肯定比10000大,你能否说明具体点,包括提取的方法......。
4楼2014-03-05 16:55:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

我也觉得应该是载体自连啊!
5楼2014-03-05 18:16:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jjwhl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 00:55:45
这是很常见的问题,不影响,你可以拿这个提取出来的质粒用你的特异性引物进行PCR验证是否有目的基因插入
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
6楼2014-03-05 18:39:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jjwhl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 00:55:55
你选几个酶切位点酶切再验证一下。差异这么大一定有些问题。
hehe
7楼2014-03-05 21:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by forrestgump at 2014-03-05 16:55:41
可能是基因组,要是大肠杆菌的基因组肯定比10000大,你能否说明具体点,包括提取的方法......。

提取的话 是用的宝生生物的质粒out试剂盒,我要从大肠杆菌中提一个师姐构建好的重组质粒,pET28a5300左右 ,目的片段大约1700左右,提出来的看着远大于10000啊
8楼2014-03-05 22:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-03-05 18:16:36
我也觉得应该是载体自连啊!

要是自连接的话 怎么操作呢
9楼2014-03-05 22:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-05 21:10:23
你选几个酶切位点酶切再验证一下。差异这么大一定有些问题。

前面双酶切了两次 酶切完了 都没条带啊
10楼2014-03-05 22:47:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jjwhl 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 346求调剂[0856] +4 WayneLim327 2026-03-16 7/350 2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +6 梨花珞晚风 2026-03-17 6/300 2026-03-21 03:40 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 初始318分求调剂(有工作经验) +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
信息提示
请填处理意见