24小时热门版块排行榜    

查看: 3693  |  回复: 13

jjwhl

银虫 (正式写手)

[求助] 重组质粒提取,结果提取片段跑胶 比实际还大,请各位大侠给指点一下 已有6人参与

小虫再做大肠杆菌重组质粒(线性质粒加目的基因共6700左右)提取,结果提取片段跑胶 比10000还大,请各位大侠给指点一下
重组质粒提取,结果提取片段跑胶 比实际还大,请各位大侠给指点一下
1.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)

这是载体自连接吗?求指导
2楼2014-03-05 16:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

你这是跑的质粒?建议单酶切后与原先的载体对比一下。
3楼2014-03-05 16:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jjwhl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 00:55:38
可能是基因组,要是大肠杆菌的基因组肯定比10000大,你能否说明具体点,包括提取的方法......。
4楼2014-03-05 16:55:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)

我也觉得应该是载体自连啊!
5楼2014-03-05 18:16:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jjwhl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 00:55:45
这是很常见的问题,不影响,你可以拿这个提取出来的质粒用你的特异性引物进行PCR验证是否有目的基因插入
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
6楼2014-03-05 18:39:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jjwhl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 00:55:55
你选几个酶切位点酶切再验证一下。差异这么大一定有些问题。
hehe
7楼2014-03-05 21:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by forrestgump at 2014-03-05 16:55:41
可能是基因组,要是大肠杆菌的基因组肯定比10000大,你能否说明具体点,包括提取的方法......。

提取的话 是用的宝生生物的质粒out试剂盒,我要从大肠杆菌中提一个师姐构建好的重组质粒,pET28a5300左右 ,目的片段大约1700左右,提出来的看着远大于10000啊
8楼2014-03-05 22:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jiaoxiayoulu at 2014-03-05 18:16:36
我也觉得应该是载体自连啊!

要是自连接的话 怎么操作呢
9楼2014-03-05 22:46:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jjwhl

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-03-05 21:10:23
你选几个酶切位点酶切再验证一下。差异这么大一定有些问题。

前面双酶切了两次 酶切完了 都没条带啊
10楼2014-03-05 22:47:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jjwhl 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 基金啊基金 +3 longfie172 2026-08-20 3/150 2026-08-21 00:04 by wuchongjun
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 言之凿凿,明天官网会通知放榜? +15 医学老男孩 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:35 by CaoLG
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 22/1100 2026-08-20 17:03 by yaoyewhu2008
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见