应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 原核表达重组质粒提取
81/1返回列表
查看: 2143  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

芥末猫

银虫 (小有名气)

[交流] 原核表达重组质粒提取 已有6人参与

菌液pcr检测有微弱的目的条带，扩大培养，离心有沉淀，提质粒，电泳检测没带，测浓度5-11, 是不是水加多了，浓度太低？能不能去测序呢
有沉淀是不是就是有质粒的意思啊？
急，求教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-12 17:36:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fly12365

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看天: 金币+4, 鼓励 常来 2012-05-13 00:05:33
你的载体是什么载体？有可能是载体拷贝少。菌液离心后的沉淀是菌体的沉淀，电泳没条带，而检测显示数据可能是溶解液有杂质；浓度低还有可能是加裂解液时摇晃剧烈；另一个原因可能是培养时间过长使菌体死亡，从而质粒部分没法提出
赞一下 回复此楼
2楼2012-05-12 21:59:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiongyaoling

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
质粒浓度太底，会导致信号弱，不能用来测序！
赞一下 回复此楼
3楼2012-05-13 08:58:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Apeterson

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
测序应该是不能，你的浓度太低了，看来楼主还是要重新再提一下。。
赞一下 回复此楼
考研奋斗中····
4楼2012-05-13 09:36:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhsDONG

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
只要你的转化子能够P出目的片段，就应该可以测序！直接拿菌液测序呀！
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-13 14:32:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
即使浓度低也能测序的，因为公司通常做法是，拿到质粒后会自己做转化，提质粒测序。
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
6楼2012-05-13 20:53:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芥末猫

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zhsDONG at 2012-05-13 14:32:01:
只要你的转化子能够P出目的片段，就应该可以测序！直接拿菌液测序呀！

但是菌液的条带很暗，而且同时还有像是引物二聚体的带，挺亮的
赞一下 回复此楼
7楼2012-05-14 10:16:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

viki_MDK

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
根据经验，应该是假阳性，有可能是没有质粒的。
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-14 10:38:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 芥末猫 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-25 01:47 by BZKMTicpDhFj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 6/300 2026-08-25 00:11 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭