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原核表达的问题
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liujinlj0305
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虫号: 1332466
注册: 2011-06-27
专业: 环境微生物学
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原核表达的问题
最近在构建重组质粒,用pTYB12作载体连一个1900bp左右的片段,转化ER2566,在转化板上挑取阳性克隆后做酶切验证,始终只看到切开的载体片段,没看到目的片段;提取阳性克隆的质粒与pTYB12跑胶比对,发现是比载体要大的;做PCR验证也扩出来了1900的条带,阴性对照也没有条带出现;后来试着做了下诱导表达,结果没看见诱导条带出现。现在对这种情况感觉真是有点烦躁了,不知道哪位高手帮忙解答一下啊!
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版面费该交吗
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基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书
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面上可以超过30页吧?
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2012-03-10 17:13:29
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专业: 微生物遗传育种学
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liujinlj0305: 金币+10,
★★★
很有帮助
2012-04-16 14:45:34
应该是没转化成功,重新连连试试
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2楼
2012-04-16 14:44:49
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专业: 微生物生理与生物化学
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一般构建好的工程菌要先测序的,不知道楼主有没有测序
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3楼
2012-04-16 16:10:27
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专业: 环境微生物学
【答案】应助回帖
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会不会是酶切时间长了点,把小片段切没了?
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4楼
2012-04-18 15:01:45
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