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最近在构建重组质粒,用pTYB12作载体连一个1900bp左右的片段,转化ER2566,在转化板上挑取阳性克隆后做酶切验证,始终只看到切开的载体片段,没看到目的片段;提取阳性克隆的质粒与pTYB12跑胶比对,发现是比载体要大的;做PCR验证也扩出来了1900的条带,阴性对照也没有条带出现;后来试着做了下诱导表达,结果没看见诱导条带出现。现在对这种情况感觉真是有点烦躁了,不知道哪位高手帮忙解答一下啊! |
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