应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 含有稀有密码子的基因想在大肠杆菌中做原核表达，Rosetta菌株
121/2返回列表12下一页
查看: 3631  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

mmcniu

新虫 (小有名气)

[求助] 含有稀有密码子的基因想在大肠杆菌中做原核表达，Rosetta菌株

RaCC results:

Red = rare Arg codons AGG, AGA, CGA
Green = rare Leu codon CTA
Blue = rare Ile codon ATA
Orange = rare Pro codon CCC

其中含有一个CGA，Rosetta也不能解决这个问题（其他的都ok），该怎么办呢？我要放弃原核表达吗？

第一次做这方面实验，请有经验的多多帮助，谢谢！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-27 23:04:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-10-28 12:18:38
mmcniu: 金币+1, 3x 2013-10-30 21:17:21
mmcniu: 金币+1, ★★★很有帮助, 3x 2013-10-30 21:17:56
你这个稀有密码子，也不一定完全不能表达但产量肯定很少。可以考虑同义突变，或者干脆换真核表达
赞一下(1人) 回复此楼
岂能尽如人意，但求无愧我心
5楼2013-10-28 11:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

yingying1588
★
mmcniu(金币+1): 谢谢参与
2楼2013-10-27 23:22:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

readytogo
★
mmcniu(金币+1): 谢谢参与
3楼2013-10-27 23:27:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流水有情
★
mmcniu(金币+1): 谢谢参与
4楼2013-10-27 23:35:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

phoenix211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-10-29 01:13:20
mmcniu: 金币+2, ★★★很有帮助, 3x 2013-10-30 21:18:12
如果不想换系统的话  楼主试试突变给替换掉吧
赞一下 回复此楼
6楼2013-10-28 15:13:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mmcniu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-10-28 11:53:08
你这个稀有密码子，也不一定完全不能表达但产量肯定很少。可以考虑同义突变，或者干脆换真核表达

谢谢！您提到的同义突变，是指设计这个位置相应的引物，用PCR把片段扩出来吗？
赞一下 回复此楼
7楼2013-10-28 22:51:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wilzu

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
mmcniu: 金币+1, ★★★很有帮助, 3x 2013-10-30 21:18:25
为什么不考虑双宿主的codon optimization，然后再做基因合成？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
8楼2013-10-28 23:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励交流！ 2013-10-29 16:35:28
mmcniu: 金币+2, ★★★★★最佳答案, 3x 2013-10-30 21:18:43
引用回帖:
7楼: Originally posted by mmcniu at 2013-10-28 22:51:12
谢谢！您提到的同义突变，是指设计这个位置相应的引物，用PCR把片段扩出来吗？...

CGA——>精氨酸（Arg/R），同义密码子有CGU,CGG,CGC,AGA,AGG，其中CGU,CGC不是稀有密码子。

所以可以设计引物，把CGA突变成CGU/CGC。

如果这CGA靠近两端，就比较省事了；如果在基因中间，就得设计两对引物按照重叠PCR的思路做了，换句话说就是比较麻烦。。。
赞一下 回复此楼
岂能尽如人意，但求无愧我心
9楼2013-10-29 16:08:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mmcniu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wilzu at 2013-10-28 23:21:50
为什么不考虑双宿主的codon optimization，然后再做基因合成？

O(∩_∩)O谢谢，不差钱的话，这是个好办法。。。
赞一下 回复此楼
10楼2013-10-29 22:52:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mmcniu 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408 327分求调剂 +3 韵风kon 2026-04-10 3/150 2026-04-11 09:48 by zhq0425
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH（等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 0703化学 +32 妮妮ninicgb 2026-04-04 37/1850 2026-04-10 22:18 by bljnqdcc
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 一志愿华东师范生物学326分，求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 生物学调剂，一志愿西南大学348，Top期刊一区二作、二区三作，三等奖学金三次 +4 candyyyi 2026-04-09 4/200 2026-04-09 18:39 by l_paradox
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所，有机化学356分找调剂 +11 Nadiums 2026-04-09 11/550 2026-04-09 18:04 by lijunpoly
[考研] 085600材料与化工，求调剂 +11 won_qii 2026-04-07 11/550 2026-04-09 17:03 by luoyongfeng
[考研] 复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 一志愿武理车辆 281 求调剂 +5 上岸研究生. 2026-04-07 5/250 2026-04-09 15:56 by only周
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 材料307分求大佬组收留 +17 Hll胡 2026-04-07 17/850 2026-04-09 10:53 by liuhuiying09
[考研] 0703总分331求调剂 +18 ZY-05 2026-04-04 22/1100 2026-04-09 09:09 by 哦哦123
[考研] 274求调剂求调剂 +10 Jachenbingoo 2026-04-06 13/650 2026-04-08 14:25 by zhq0425
[考研] 生物医药调剂｜SCI中科院三区一作+多项科研成果 +8 likangxing 2026-04-07 11/550 2026-04-08 00:02 by lys0704
[考研] 295求调剂 +18 xndjjj 2026-04-04 19/950 2026-04-07 11:02 by wangjy2002
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +5 李rien 2026-04-05 5/250 2026-04-06 10:30 by zhyzzh
[考研] 298求调剂 +7 manman511 2026-04-05 7/350 2026-04-05 10:29 by 唐沐儿
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭