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zxd95至尊木虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】关于原核表达中稀有密码子的问题 已有5人参与
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真核基因的原核表达中经常出现稀有密码子问题，导致真核基因不表达的现象。去年我做了pET32a-AtPAP1在BL21（DE3）的原核表达，结果是能够表达的，只是80%的是包涵体，20%的是可溶性蛋白。我现在使用在线密码子分析软件进行分析，结果表明稀有密码子共35个，其中大肠杆菌不能合成的有24个 (AUA, AGG, AGA, CUA,CCC, GGA)= 24/248=9.68%。请问各位虫友，既然大肠杆菌不能合成这些氨基酸，为什么还能够进行原核表达出完整的蛋白？？？？？ 附： AtPAP1 ATG GAG GGT TCG TCC AAA GGG CTG CGA AAA GGT GCT TGG ACT ACT GAA GAA GAT AGT CTC TTG AGA CAG TGC ATT AAT AAG TAT GGA GAA GGC AAA TGG CAC CAA GTT CCT GTAAGA GCT GGG CUA AAC CGG TGC AGG AAA AGT TGT AGA TTA AGA TGG TTG AAC TAT TTG AAG CCA AGT ATC AAG AGA GGA AAA CTT AGC TCT GAT GAA GTC GAT CTT CTT CTT CGC CTT CAT AGG CTT CUA GGG AAT AGG TGG TCT TTA ATT GCT GGA AGA TTA CCT GGT CGG ACC GCA AAT GAC GTC AAG AAT TAC TGG AAC ACT CAT CTG AGT AAG AAA CAT GAA CCG TGT TGT AAG AUA AAG ATG AAA AAG AGA GAC ATT ACG CCC ATT CCT ACA ACA CCG GCA CUA AAA AAC AAT GTT TAT AAG CCT CGA CCT CGA TCC TTC ACA GTT AAC AAC GAC TGC AAC CAT CTC AAT GCC CCA CCA AAA GTT GAC GTT AAT CCT CCA TGC CTT GGA CTT AAC ATC AAT AAT GTT TGT GAC AAT AGT ATC AUA TAC AAC AAA GAT AAG AAG AAA GAC CAA CUA GTG AAT AAT TTG ATT GAT GGA GAT AAT ATG TGG TTA GAG AAA TTC CUA GAG GAA AGC CAA GAG GTA GAT ATT TTG GTT CCT GAA GCG ACG ACA ACA GAA AAG GGG GAC ACC TTG GCT TTT GAC GTT GAT CAA CTT TGG AGT CTT TTC GAT GGA GAG ACT GTG AAA TTT GAT 744bp 248aa |
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