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yumupeipei铜虫 (小有名气)
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质粒的提取及测序问题 已有2人参与
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| 最近在做转化,挑取阳性单克隆摇菌后,菌液PCR有目的片段(1800bp),提质粒,电泳发现无条带,可用该质粒做模板进行PCR能出现目的条带,送样进行测序,也总是反馈说信号太弱,这到底是怎么回事,还望各位大虾指点! |
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我觉得是不是需要确认一下做的胶是否正常,因为既然既然能用质粒pcr做出东西来,里面肯定还是存在着模板的,反应弱无非就是模板的浓度不够或者是引物结合的效率有问题,根据你的描述我觉得浓度的原因更大,可以用目的基因的引物来P一下质粒,用其产物测序也是可以验证一下的 [ 发自小木虫客户端 ] |
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