| 查看: 2456 | 回复: 9 | ||
yumupeipei铜虫 (小有名气)
|
[求助]
质粒的提取及测序问题 已有2人参与
|
| 最近在做转化，挑取阳性单克隆摇菌后，菌液PCR有目的片段（1800bp），提质粒，电泳发现无条带，可用该质粒做模板进行PCR能出现目的条带，送样进行测序，也总是反馈说信号太弱，这到底是怎么回事，还望各位大虾指点！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有186人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 碱裂解法提取质粒时怎么减少RNA？
已经有7人回复
- 有关质粒提取的问题。。。急！！！
已经有11人回复
- 重组质粒，摇菌提取质粒后，如何测序？
已经有5人回复
- 细菌质粒提取浓度太低求助
已经有29人回复
- 如何获取目的质粒？
已经有8人回复
- 测序质粒提不出来
已经有6人回复
- 线粒体测序问题
已经有10人回复
- 得到一个质粒序列后，如何进行分析？
已经有4人回复
- 转化感受态后提取质粒，测浓度总是很低
已经有17人回复
- 请教不知道质粒信息的情况下，怎样设计引物来进行测序
已经有7人回复
- Fosmid质粒提取问题
已经有7人回复
- 如何提高PET-28a质粒提取浓度？
已经有13人回复
- 质粒浓度很低 无法测序 求挽救措施
已经有10人回复
- 目的基因连接到克隆载体后提取质粒测序，序列有问题
已经有11人回复
- 质粒测序后发现有重叠现象
已经有13人回复
- 转化后提不出质粒
已经有11人回复
- 原核表达重组质粒提取
已经有7人回复
- 【求助/交流】质粒浓度达到多少 测序没有问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？
已经有4人回复
- 【求助/交流】什么会造成质粒的丢失？
已经有40人回复
- 【求助/交流】BAC 质粒抽提
已经有21人回复
dnvcqw
新虫 (初入文坛)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 3605.1
- 红花: 2
- 帖子: 32
- 在线: 33.2小时
- 虫号: 1903895
- 注册: 2012-07-21
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yumupeipei: 金币+8 2014-03-10 11:23:27
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-10 19:41:44
yumupeipei: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-03-25 08:30:51
感谢参与，应助指数 +1
yumupeipei: 金币+8 2014-03-10 11:23:27
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-10 19:41:44
yumupeipei: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-03-25 08:30:51
|
我觉得是不是需要确认一下做的胶是否正常，因为既然既然能用质粒pcr做出东西来，里面肯定还是存在着模板的，反应弱无非就是模板的浓度不够或者是引物结合的效率有问题，根据你的描述我觉得浓度的原因更大，可以用目的基因的引物来P一下质粒，用其产物测序也是可以验证一下的 [ 发自小木虫客户端 ] |
yumupeipei2楼2014-03-10 11:10:42
鬼羽帝魂
木虫 (著名写手)
- 应助: 183 (高中生)
- 金币: 3100.2
- 散金: 19
- 红花: 12
- 帖子: 1427
- 在线: 186.8小时
- 虫号: 2538789
- 注册: 2013-07-09
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2014-03-10 11:11:48
4楼2014-03-10 11:15:03
5楼2014-03-10 11:16:38
yumupeipei
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: -4
- 帖子: 88
- 在线: 69.8小时
- 虫号: 2121633
- 注册: 2012-11-12
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2014-03-10 11:22:48
yumupeipei
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: -4
- 帖子: 88
- 在线: 69.8小时
- 虫号: 2121633
- 注册: 2012-11-12
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2014-03-10 11:24:31
yumupeipei
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: -4
- 帖子: 88
- 在线: 69.8小时
- 虫号: 2121633
- 注册: 2012-11-12
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2014-03-10 11:24:39
9楼2014-03-10 11:42:44
10楼2015-08-20 10:28:19
