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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Fosmid质粒提取问题
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小白的桥段

新虫 (初入文坛)

[求助] Fosmid质粒提取问题

建了一个Fosmid库，现在卡在质粒提取这里，我用3ml的LB液体培养，加抗生素和诱导剂后用接种环刮一点菌进去，然后37度，170rpm培养，可是过夜培养后（14-16小时），菌株生长的不够浑浊，有的时候还形成小颗粒，这样提出来的质粒带就很弱，不能做酶切。
请教各位，这个fosmid质粒到底应该怎么提呢？无论是试剂盒还是操作上的具体细节还请指教一下。多谢。
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1楼 2013-01-01 10:27:19
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55晴朗天天

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有小颗粒是不是菌不纯，或者污染了呢，我没提过质粒，不过我一般摇的时候都是挑单菌落进去 过夜~元旦快乐
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有梦就有希望！想就有可能！
2楼2013-01-01 11:11:25
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lilinling203

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yqbter: 金币+1, 鼓励发帖！ 2013-01-01 20:39:11
可以看下唉http://www.docin.com/p-229684460.html ，希望对你有帮助
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3楼2013-01-01 17:13:24
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小白的桥段

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 55晴朗天天 at 2013-01-01 11:11:25
有小颗粒是不是菌不纯，或者污染了呢，我没提过质粒，不过我一般摇的时候都是挑单菌落进去 过夜~元旦快乐

元旦快乐~~！感谢回复，我一直在抗生素的板上培养，污染的可能性不大，即使有污染在抗生素的环境里也长不起来的吧。我以前提取小质粒，随便提提都很亮的，这个真是挫败啊……
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4楼2013-01-03 18:59:50
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小白的桥段

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lilinling203 at 2013-01-01 17:13:24
可以看下唉http://www.docin.com/p-229684460.html ，希望对你有帮助

非常感谢回复和关注，我之前看到这个帖子了，也尝试过先摇种子液的方法，可是过夜培养后不太长，做不成种子液……
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5楼2013-01-03 19:01:24
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小白的桥段

新虫 (初入文坛)
使劲顶顶，顶顶顶顶顶~~~2013，给力啊~~！
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6楼2013-01-03 19:02:46
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早起有虫吃

新虫 (初入文坛)
请问你后来怎么提出来的呢？我现在遇到了同样的问题 卡在提质粒这里一个月了求指教
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7楼2015-04-17 12:16:31
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文明阳

新虫 (初入文坛)
请问现在还是否有fosmid质粒，我也打算构建文库
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8楼2015-05-25 17:31:53
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