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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为何条带是中空的
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184292196

木虫 (正式写手)

[求助] 为何条带是中空的已有6人参与

跑出来的DNA条带，经过EB染色后，都是中空的，不知道是什么原因，请大家帮忙分析下！

为何条带是中空的


为何条带是中空的-1
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1楼2014-09-08 14:05:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
184292196(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-12 10:42:22
184292196: 金币+5 2014-09-13 15:35:59
你是先加样再把胶浸泡到电泳液中吧，样品粘到加样孔的壁上，电泳前就是中空的。上样量少就会这样。
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24楼2014-09-12 08:54:04
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joblee

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-08 16:22:11
184292196: 金币+5 2014-09-11 20:00:32
上样量偏高，可减小上样量，或者换大孔梳子试试，跑出来的条带应该会漂亮许多

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-09-08 16:16:10
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184292196

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by joblee at 2014-09-08 16:16:10
上样量偏高，可减小上样量，或者换大孔梳子试试，跑出来的条带应该会漂亮许多

我每孔上10ul，用的是中孔胶。这个上样量多吗？
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3楼2014-09-09 08:41:40
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a314919473

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
184292196: 金币+5 2014-09-11 20:00:47
我觉得应该是你电泳的电压调的太大了原因，电压70V就好，不要超过100V
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有你真好
4楼2014-09-09 09:07:31
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joblee

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
184292196: 金币+50 2014-09-09 09:27:23
引用回帖:
3楼: Originally posted by 184292196 at 2014-09-09 08:41:40
我每孔上10ul，用的是中孔胶。这个上样量多吗？...

如果只为检测产物，且DNA浓度很高，中孔上样量只需0.5或1 uL可得到理想的条带。若目的是回收，则可使用大孔。
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5楼2014-09-09 09:15:10
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joblee

木虫 (正式写手)
西门吹雪170: 屏蔽内容, 重复 2014-09-09 10:47:16
本帖内容被屏蔽
6楼2014-09-09 09:18:04
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184292196

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by a314919473 at 2014-09-09 09:07:31
我觉得应该是你电泳的电压调的太大了原因，电压70V就好，不要超过100V

现在用的是100V，我降一点电压试试。谢谢啊
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7楼2014-09-09 09:24:38
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184292196

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by joblee at 2014-09-09 09:18:04
如果只为检测产物，且DNA浓度很高，中孔上样量只需0.5或1 ul即可得到理想的条带。若目的是回收，则可使用大孔。...

好的，我减少上样量看看。谢谢啊！
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8楼2014-09-09 09:26:56
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qapollo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
184292196(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-10 08:49:28
184292196: 金币+5 2014-09-11 20:01:13
你这可能是样品扩散了，快点点样、电泳时间不要太长就可避免这种现象。
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9楼2014-09-09 13:03:57
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184292196

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by qapollo at 2014-09-09 13:03:57
你这可能是样品扩散了，快点点样、电泳时间不要太长就可避免这种现象。

我上样比以前快了，可还是这样，电泳大概是35分钟，染色20分钟这样。
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10楼2014-09-09 18:45:44
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