| 查看: 2725 | 回复: 9 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
设计了两对引物，但是结果不一样 已有2人参与
|
||
|
设计了两队引物，但是结果不一样。模板是cDNA，p出来的是不跨内含子的那对引物，P不出来的是跨内含子的那对引物（但是阳性对照P出来了），觉得很奇怪，所以我怀疑是DNA污染，因此我用这个样品p了一个文献上不能表达的基因，如果有基因污染的话，按理说应该P得出来，但是奇怪的是没有P出来（阳性对照P出来了），所以现在不知道到底是什么原因导致的，求大神解答，附图如下： 谢谢   不跨内含子的引物.jpg  跨内含子.jpg  已知不表达的基因.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有265人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于一对引物同时扩增多个不同基因的问题
已经有10人回复
- real-time引物设计问题，关于保守取，内含子
已经有10人回复
- 请教不知道质粒信息的情况下，怎样设计引物来进行测序
已经有7人回复
- 求助设计引物时酶切位点保护碱基的问题
已经有19人回复
- 一段序列设计的同一个引物在Primer Premier5.0和Oligo 6.0分析结果不一样
已经有4人回复
- 基因的下半部分已经测序完成，引物设计了两次上半部分总是扩不出来是什么原因？
已经有11人回复
- 求助设计引物加两个酶切位点
已经有10人回复
- Realtime PCR 内参与目的基因问题
已经有11人回复
- 测序结果分析，以及RACE引物设计。求助呢
已经有3人回复
- 设计了3条引物，请大家帮我看看是否可用，两个哪个好一些呢？谢谢了！
已经有12人回复
- 如何通过已知序列设计引物获得该基因的全序列？
已经有12人回复
- 引物设计区域选择问题
已经有7人回复
- 利用Primer 5设计引物问题
已经有6人回复
- 设计的引物错了一个碱基对后续试验影响大吗？
已经有6人回复
- PCR引物扩增的问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】两条序列只有1-2个变异位点，能设计特异引物区别出来吗？
已经有23人回复
- 【求助/交流】设计的引物在NCBI blast中比对居然没有我的目的片段
已经有5人回复
- 【求助/交流】怎样设计目的基因的引物
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于启动子区域克隆
已经有11人回复
- 【求助/交流】PCR之后的产物与设计引物时产物的大小不符？
已经有7人回复
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 911 (博后)
- 金币: 17546.8
- 散金: 1682
- 红花: 121
- 沙发: 42
- 帖子: 14620
- 在线: 2206.4小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
8楼2014-09-09 14:21:51
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-08 16:24:27
lmc2537: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-09 10:09:41
lmc2537: 金币+2, ★有帮助 2014-09-09 19:59:50
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-08 16:24:27
lmc2537: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-09 10:09:41
lmc2537: 金币+2, ★有帮助 2014-09-09 19:59:50
| 你不跨内含子的引物能扩出来，跨的扩不出来，很可能不是cDNA出问题，而是你引物出问题了，你是按照预测的序列来设计的吧，很可能预测序列和真实序列有点出入导致，要想验证这个想法对不对你可以再外围不跨区域再设计对引物，扩出来后扩个二次就清楚了 |
2楼2014-09-08 08:34:29
我欲乘风归去
木虫 (正式写手)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 3280.1
- 散金: 1055
- 红花: 26
- 帖子: 841
- 在线: 878.8小时
- 虫号: 3340869
- 注册: 2014-07-27
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
3楼2014-09-08 09:15:45
4楼2014-09-09 10:07:47
10