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sootiey

银虫 (小有名气)

[求助] 如何通过已知序列设计引物获得该基因的全序列?

我已经通过保守序列设计引物p 出了一个基因的部分序列890bp,这个基因全长约1200bp,如何获得该基因的全序列啊?
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我同学有做的他用的巢式pcr做的,你再看些资料吧
3楼2012-08-17 00:09:49
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普通回帖

sootiey

银虫 (小有名气)

补充一下,通过同源比对,和其最接近的菌种同源性为90%,能不能根据这个菌种的末端序列直接设计引物?
2楼2012-08-16 22:01:17
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以做5‘和3’RACE把获得全长哈楼主
4楼2012-08-17 07:28:56
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sootiey

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-17 07:28:56
可以做5‘和3’RACE把获得全长哈楼主

我做的这个是细菌,也可以用RACE吗?
5楼2012-08-17 13:28:12
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sootiey

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by woshizhufeng at 2012-08-17 00:09:49
我同学有做的他用的巢式pcr做的,你再看些资料吧

谢谢啦,我先查些资料看一下
6楼2012-08-17 13:28:56
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


sootiey: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-08-24 21:29:59
引用回帖:
5楼: Originally posted by sootiey at 2012-08-17 13:28:12
我做的这个是细菌,也可以用RACE吗?...

可以的,具体可以参照http://blog.sina.com.cn/s/blog_507b0e4601008gri.html
7楼2012-08-17 14:25:35
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tiani_tan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
细菌的话可以试着通过同源克隆法(比较普遍)获得基因的全长,或者查阅文献看看有没有相关文献报道;同源法得不到结果,再用RACE技术吧。
8楼2012-08-17 15:45:16
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axian

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
RACE 吧,现在好多用这个技术的,应该没问题,
9楼2012-08-17 16:25:03
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geniusrkx

铁杆木虫 (小有名气)

才虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
takara有RACE的试剂盒
我活着,我精彩
10楼2012-08-19 13:31:22
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