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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何通过已知序列设计引物获得该基因的全序列？
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代号47

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
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sootiey: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-08-24 21:32:51
我建议楼主用一下这个方法：既然有菌跟目标有百分之90的相似，那么，你可以用它的两端设计兼并引物，兼并引物设计的时候注意密码子的偏好性，这样能提高批出基因的概率。
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11楼2012-08-19 15:29:42
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sootiey

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 代号47 at 2012-08-19 15:29:42
我建议楼主用一下这个方法：既然有菌跟目标有百分之90的相似，那么，你可以用它的两端设计兼并引物，兼并引物设计的时候注意密码子的偏好性，这样能提高批出基因的概率。

正在用这个方法，已经设计好了两对引物，PCR分别显示有两条和三条，正准备提高退火温度再P，谢谢啦
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12楼2012-08-24 21:29:10
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sootiey

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by tiani_tan at 2012-08-17 15:45:16
细菌的话可以试着通过同源克隆法（比较普遍）获得基因的全长，或者查阅文献看看有没有相关文献报道；同源法得不到结果，再用RACE技术吧。

这个方法还没有试过，感谢一下先
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13楼2012-08-24 21:31:34
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