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sootiey

银虫 (小有名气)

[求助] 如何通过已知序列设计引物获得该基因的全序列?

我已经通过保守序列设计引物p 出了一个基因的部分序列890bp,这个基因全长约1200bp,如何获得该基因的全序列啊?
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sootiey

银虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 代号47 at 2012-08-19 15:29:42
我建议楼主用一下这个方法:既然有菌跟目标有百分之90的相似,那么,你可以用它的两端设计兼并引物,兼并引物设计的时候注意密码子的偏好性,这样能提高批出基因的概率。

正在用这个方法,已经设计好了两对引物,PCR分别显示有两条和三条,正准备提高退火温度再P,谢谢啦
12楼2012-08-24 21:29:10
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sootiey

银虫 (小有名气)

补充一下,通过同源比对,和其最接近的菌种同源性为90%,能不能根据这个菌种的末端序列直接设计引物?
2楼2012-08-16 22:01:17
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我同学有做的他用的巢式pcr做的,你再看些资料吧
3楼2012-08-17 00:09:49
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以做5‘和3’RACE把获得全长哈楼主
4楼2012-08-17 07:28:56
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