| 查看: 1679 | 回复: 4 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
zhjzhou木虫 (著名写手)
|
[求助]
克隆大片段的序列如何设计引物
|
||
| 大家好，我现在要克隆几个3000bp左右的基因，现在设计引物，用cDNA序列和CDS序列比对后，有的前面对上，后面不匹配；有的前面不匹配，后面匹配。而且用ATG前面的序列设计引物，没有特异性，这样该怎么设计引物啊？请大虾指点下，谢谢！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 实用资源 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有89人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- primer 5 设计引物的问题
已经有16人回复
- 求助！大片段4kb左右基因PCR克隆方法
已经有15人回复
- PCR引物设计的问题
已经有8人回复
- 求助 酶的功能基因中如何根据片段基因得到全段序列~急
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于启动子区域克隆
已经有11人回复
- 【求助/交流】PCR产物测序总是不对
已经有13人回复
- 【求助/交流】基因克隆设计引物
已经有7人回复
- 【求助/交流】一个基因大概有2500bp左右。很长很长时间了，还没搞定，郁闷！请各位大�
已经有5人回复
- 【求助/交流】求助基因克隆方面的问题解决方案
已经有17人回复
- 克隆基因全长引物设计问题
已经有32人回复
yunzhifei
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 32331.8
- 红花: 39
- 帖子: 1090
- 在线: 587.4小时
- 虫号: 1460331
- 注册: 2011-10-25
- 性别: GG
- 专业: 基因组学
2楼2011-10-31 19:21:36
zhjzhou
木虫 (著名写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 4918.4
- 散金: 1910
- 红花: 5
- 帖子: 1243
- 在线: 145.1小时
- 虫号: 42073
- 注册: 2004-03-09
- 专业: 蛋白质组学
3楼2011-10-31 21:05:54
4楼2011-11-01 20:55:27
dog_608582
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2680.1
- 帖子: 516
- 在线: 51.4小时
- 虫号: 465132
- 注册: 2007-11-22
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！流程说得很清楚了！ 2011-11-02 21:44:35
zhjzhou(金币+3): 谢谢！ 2011-11-03 10:11:28
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！流程说得很清楚了！ 2011-11-02 21:44:35
zhjzhou(金币+3): 谢谢！ 2011-11-03 10:11:28
| 你是要想得到3KB的cDNA 片段吗？如果是，简单的方法是用RACE的方法，先得到一个小片段，然后利用加头加尾的特殊引物把5‘和3’端的序列拿到后，在根据3‘和5’的序列设计特异性引物把全长的cDNA扩增出来。具体你可以查RACE方法。至于先得到小片段，要根据你已有的信息去设计简并引物什么的。祝好运！另外，3KB不大，引物我都克隆过超过8KB的基因。 |
5楼2011-11-02 09:13:06
