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wulelexinhun

银虫 (初入文坛)

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[求助] 3885bp大小的基因如何进行PCR效果比较好已有8人参与

跪求各位大神，3885bp大小的基因如何进行PCR效果比较好？最好是不能有突变

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乐

1楼2014-08-22 23:47:49

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ncuduhan

银虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

7楼: Originally posted by pf790352975 at 2014-08-27 22:32:12
prime star max 6kb的应该没问题吧目前在做重叠pcr 理论上连接后接近6kb 但是做了两次都没p出之前用该酶重叠pcr出 3600kb的片段不知道你p过最长的是多少还有说明书上推荐的5-10s/kb 你试验过吗？谢谢...

我在PCR一个大概2100bp的时候，常规条件没有P出来，后来按照说明说条件试了下
98° 10s
55° 15s
72° 1min30s
是巢式PCR 因为我要在这个基因的后边加上一个大概60bp的片段，是用引物加上的