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Lynn和Mia

金虫 (小有名气)

[交流] 求助求助！！！不同大鼠的同一基因的荧光定量实时PCR实验是否需要设计不同的引物

Wistar大鼠和SD大鼠的同一基因的荧光定量实时PCR实验是否需要设计不同的引物？实验目的是为确定起始量。小妹最近才做PCR，很多不懂，请高人指点~~~~
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1楼 2012-09-07 19:52:22
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小小技术官

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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Lynn和Mia: 金币+5 2012-09-08 13:01:45
建议你先将两基因的序列比对一下，如果差异不大，应该可以使用同一引物。
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2楼2012-09-07 20:00:13
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Lynn和Mia

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小技术官 at 2012-09-07 20:00:13
建议你先将两基因的序列比对一下，如果差异不大，应该可以使用同一引物。

谢谢回复~~
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3楼2012-09-08 13:02:19
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Lynn和Mia

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小小技术官 at 2012-09-07 20:00:13
建议你先将两基因的序列比对一下，如果差异不大，应该可以使用同一引物。

那个，我在NCBI的GENE上查该基因，只能查到大鼠，没注明是哪一种大鼠，Wistar或SD，是不是我查的方法不对？该怎样查呢？
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4楼2012-09-09 10:54:28
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小小技术官

木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
4楼: Originally posted by Lynn和Mia at 2012-09-09 10:54:28
那个，我在NCBI的GENE上查该基因，只能查到大鼠，没注明是哪一种大鼠，Wistar或SD，是不是我查的方法不对？该怎样查呢？...

看下该基因是否影响其品系的划分吧，如果是重要的管家基因，感觉没必要重新设计引物了。

未命名.jpg
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5楼2012-09-09 13:32:34
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阿菁

新虫 (小有名气)
★
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6楼2012-11-01 12:00:56
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titus0805

铁虫 (小有名气)
★
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如果不用同一引物就不用做了，引物不一样没法比
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7楼2012-11-01 12:58:27
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dqmao

木虫 (著名写手)
★
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我在2002年前就做过荧光定量PCR，荧光说比较简单。如果这两段基因序列差别不大，确定是同一段基因，那么引物可以用同一段就可以。正如上面的老兄所说，如果是老鼠的管家基因，应该就是一样的，用同一段引物就可以的。当然，在具体做PCR的时候，结果，我想也可以暂时验证一下。争取做到万无一失。
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8楼2013-01-11 11:30:37
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卓勤

金虫 (正式写手)
★
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应该不需要，同一物种的
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9楼2013-01-17 10:29:06
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