应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 3885bp大小的基因如何进行PCR效果比较好
121/2返回列表12下一页
查看: 2228  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wulelexinhun

银虫 (初入文坛)

[求助] 3885bp大小的基因如何进行PCR效果比较好 已有8人参与

跪求各位大神，3885bp大小的基因如何进行PCR效果比较好？最好是不能有突变
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
乐
1楼 2014-08-22 23:47:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用好点的酶吧，其实3000多不算长的，不想突变用高保真酶
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-23 07:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用高保真酶直接拉呗
赞一下 回复此楼
没有做不到，只有想不到！
3楼2014-08-25 22:19:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

中庸001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

直接拿高保真酶p就行，这不算什么太大的难p片段啊。
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-26 08:57:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

令狐少陈

铜虫 (小有名气)
推荐个酶，NEB的Fhusion，很好用，货号 M0531S 不是广告，真的不错就是有点贵！
赞一下 回复此楼
多多交流，海纳百川
5楼2014-08-26 10:34:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
wulelexinhun(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-26 22:23:46
用高保真的酶PCR吧，我们实验室用的是primeSTAR，如果你发现效果不好的话，可以用巢式PCR~~
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-26 12:47:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
7楼2014-08-27 22:32:12
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by pf790352975 at 2014-08-27 22:32:12
prime  star max 6kb的应该没问题吧   目前在做重叠pcr 理论上连接后接近6kb 但是做了两次都没p出  之前用该酶重叠pcr出 3600kb的片段  不知道你p过最长的是多少  还有说明书上推荐的5-10s/kb 你试验过吗？谢谢...

我在PCR一个大概2100bp的时候，常规条件没有P出来，后来按照说明说条件试了下
98°  10s
55°  15s
72°   1min30s
是巢式PCR   因为我要在这个基因的后边加上一个大概60bp的片段，是用引物加上的
赞一下 回复此楼
8楼2014-08-28 10:25:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

首选Pfu酶，高保真；
如果不能扩增这么长的片段再用LA Taq，保真性比较高，扩增长片段。
赞一下 回复此楼
9楼2014-08-28 10:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

轻风伊始

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Primerstar保真性不错，3点多不算长的，overlap pcr就是再长一点也能搞定……大胆的去做吧，祝楼主顺利……

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2014-08-28 11:03:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wulelexinhun 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 明天E口面上会评 +4 布布和一二 2026-07-12 5/250 2026-07-13 10:44 by zzybjr
[公派出国] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 4/200 2026-07-13 10:35 by emlgkvoijw
[考博] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 4/200 2026-07-13 10:25 by emlgkvoijw
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 3/150 2026-07-13 09:56 by emlgkvoijw
[硕博家园] 大龄残疾硕士的一点执念 +17 3776737374 2026-07-06 27/1350 2026-07-13 06:05 by 鲁弥abc
[考博] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 4/200 2026-07-13 00:24 by v2i90kmrcu
[考研] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 obzynn3tuv 2026-07-11 4/200 2026-07-13 00:15 by v2i90kmrcu
[基金申请] 不要再数国自然申请书的 filecode 的分隔符个数了 +10 sadpencil 2026-07-12 15/750 2026-07-12 21:50 by sadpencil
[基金申请] 祈祷青基必中 50+6 hadengry 2026-07-09 16/800 2026-07-12 20:31 by 登山虫虫
[基金申请] 生命口会评 +11 wuke100666 2026-07-07 12/600 2026-07-11 19:30 by hhs666
[考博] 27届辽宁大学应届毕业生申博 +3 可乐微风大海 2026-07-09 3/150 2026-07-10 21:23 by 贪玩的研究僧
[基金申请] 关于如何从代码看上不上会 +17 且听虎啸 2026-07-09 23/1150 2026-07-10 19:51 by sdfapple719
[有机交流] chemdraw 20+5 ?慕鱼? 2026-07-08 6/300 2026-07-10 15:37 by 紫枫星域
[基金申请] b口会评 +6 当空照 2026-07-08 6/300 2026-07-09 20:49 by tonyliu0401
[基金申请] 信息学部会评时间 +3 xuel2011 2026-07-06 3/150 2026-07-09 19:05 by mollyzhang_2003
[考研] 在职考研 +6 wu5d 2026-07-08 7/350 2026-07-09 16:40 by 化工小霸王呀
[论文投稿] MSER送审了还被拒稿 +3 S778950906 2026-07-08 5/250 2026-07-09 15:46 by S778950906
[有机交流] 硝基还原 20+3 暮年飞雪 2026-07-07 5/250 2026-07-09 13:30 by tfang
[基金申请] 化学口会评？应用基础研究和基础研究，希望能分开 +3 Tide man 2026-07-08 3/150 2026-07-09 11:36 by dede5556
[有机交流] Suzuki偶联中硼酸酯原料掉下的硼酸酯是否可以自身偶联，生成B2Pin2杂质 500+3 天下大同 2026-07-06 3/150 2026-07-07 10:31 by martyr_oyx
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭