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纯化蛋白质问题 已有4人参与
我的蛋白质等电点大约是5.6,做纯化蛋白质时用的裂解液为PH 8.0的tris缓冲液,300ml菌液加入了10ml的裂解液,超声破碎30min.然后直接过滤进行镍柱纯化,过镍柱时用的是咪唑梯度为25,50,100,150,250的tris缓冲液,pH=8.0。
图一是进行的蛋白质可溶性分析,上清中含量较高。为什么一经过镍柱蛋白几乎就没有了呢?图2为过镍柱的图
![纯化蛋白质问题]()
蛋白质可溶性分析图片1.png
![纯化蛋白质问题-1]()
纯化蛋白图片2.png |
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